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1、 目的:本實驗采用FG、MSCs及rhBMP2(以下簡稱BMP)構(gòu)建組織工程骨,進行兔橫突間脊柱融合。通過影像學(xué)、生物力學(xué)及組織學(xué)等方法檢測脊柱融合情況,以期為脊柱融合提供更為有效的方法?! 》椒ǎ豪妹芏忍荻入x心法分離獲取幼兔股骨MSCs,以1×106/ml接種于培養(yǎng)瓶中,3天后第一次換液,以后隔天換液。待原代培養(yǎng)細胞融合成單層后,1:3傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)時使用條件培養(yǎng)液,其中含10﹪胎牛血清,VitC50μmol/L,β-甘油磷
2、酸鈉10mmol/L,地塞米松10-8mol/L。倒置顯微鏡下觀察MSCs形態(tài)及生長情況。對傳代培養(yǎng)3天的MSCs進行HE染色,觀察MSCs染色后的形態(tài);培養(yǎng)14天后進行鈣鈷法(Gomori)染色,觀察.MSCs的ALP表達情況,并計算陽性率;培養(yǎng)28天后進行Vonkossa染色,觀察MSCs鈣質(zhì)分泌;繪制第三代傳代細胞生長曲線?! 〗Y(jié)論:1.FG是較合適的組織工程載體。2.FG、MSCs及BMP構(gòu)建的組織工程骨對腰椎橫突間融合有較好
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