實驗性近視眼細胞凋亡及相關凋亡基因BCL-2和細胞因子BFGF的研究.pdf

1、　　目的：研究發(fā)育期豚鼠在配戴不同度數(shù)的凹透鏡后眼球屈光狀態(tài)和眼軸的變化，探討細胞凋亡在透鏡誘導豚鼠近視眼后極部鞏膜組織中的表達及其在近視形成中的作用；檢測透鏡誘導豚鼠近視眼后極部鞏膜組織中B細胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2)和堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)表達量的變化，探索兩種因子在近視形成中的作用。通過體外培養(yǎng)豚鼠鞏膜細胞，利用紫外線誘導細胞凋亡模型，明確凋亡抑制基因bcl-2和堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)對鞏膜細胞

2、凋亡的影響；
　　方法：第一部分：選健康豚鼠45只，隨機分成Ⅰ組(右眼配戴-20D)、Ⅱ(右眼配戴-10D)Ⅲ組(不作任何干預)。實驗前、后用檢影驗光法測量3組的屈光度，用A超測量眼軸長度。誘導2周后，過量麻醉法處死動物，摘掉眼球，取后極部鞏膜組織。用終末脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導原位缺口末端標記法(TUNEL)和免疫組織化學法檢測近視眼模型和對照組鞏膜細胞中細胞增生指數(shù)(PI)、細胞凋亡指數(shù)(AI)。探討細胞凋亡和增生在實驗性近視

3、眼發(fā)生機制中的作用。為了增加細胞凋亡檢測的準確度，應用透射電鏡檢測近視眼模型組和對照組中鞏膜成纖維細胞的超微結(jié)構(gòu)的變化，明確細胞凋亡是否存在。采用SAS統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學處理，行t檢驗和配對t檢驗對透鏡誘導豚鼠近視屈光度和眼軸結(jié)果進行分析。對透鏡誘導近視眼三組的凋亡指數(shù)和增殖指數(shù)，應用配對t檢驗進行統(tǒng)計學分析。
　　第二部分：應用免疫組織化學法對三組后極部鞏膜組織同時進行凋亡抑制基因bcl-2和堿性成纖維細胞生長因子(bFGF