加貝酯對(duì)大鼠小腸缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：廣譜的蛋白酶抑制劑加貝酯(gabexate mesilate,GM)作為一種新型酶抑制劑,可抑制多種蛋白酶,對(duì)舒血管素、胰蛋白酶、纖維蛋白酶、酯酶 C1、磷酯酶 A2均有抑制作用,抑制炎性介質(zhì)的釋放。通過(guò)研究加貝酯對(duì)大鼠小腸缺血再灌注后小腸粘膜的損傷程度影響,對(duì)小腸缺血再灌注后(ischemia/ruperfusion,IR)小腸粘膜TNF-a、IL-6、丙二醛(MDA)表達(dá)的影響,為小腸缺血再灌注損傷提出新的治療思路。
　

2、　方法：健康成年SD大鼠42只,體重在280g-320g之間,均為雄性,隨機(jī)分為對(duì)照組、缺血再灌注(IR)組和加貝酯干預(yù)組。以脫毛劑脫去腹毛發(fā),常規(guī)消毒鋪巾后取上腹部正中切口長(zhǎng)約2-3cm,進(jìn)入腹腔后快速分離腸系膜上動(dòng)脈(SMA)。對(duì)照組分離SMA后即關(guān)腹,45分鐘后再次開腹后關(guān)腹,不做其它處理。缺血再灌注組以無(wú)創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉SMA,45min后移去動(dòng)脈夾行再灌注。加貝酯組夾閉SMA45min后行再灌注，在再灌注前40min經(jīng)尾靜脈注入加

3、貝酯(10mg/kg·h)。分別于再灌注2小時(shí)采集標(biāo)本。小腸組織HE染色后病理學(xué)檢測(cè)，采集腹主動(dòng)脈血液用ELISA法檢測(cè)大鼠血清TNF-a、IL-6含量,在活體情況下距回盲部切取小腸3cm左右,測(cè)定MDA的基礎(chǔ)含量。
　　結(jié)果：(l)腸粘膜病理變化：對(duì)照組大鼠小腸絨毛完整，無(wú)明顯出血及脫落，無(wú)明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及毛細(xì)血管擴(kuò)張、淤血。IR組大鼠的小腸絨毛上皮與固有層分離,固有層出血,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),粘膜絨毛壞死脫落。加貝酯干預(yù)組腸粘

4、膜絨毛損傷較輕,小腸粘膜毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張、淤血,部分上皮下間隙增大炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較少,可見上皮層與固有層分離。對(duì)照組、IR組和加貝酯組的病理評(píng)分Chiu氏評(píng)分值分別為:0.92±0.55、4.21±0.51、2.42±0.54,各組經(jīng)檢驗(yàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p<0.05。(2)細(xì)胞因子變化:對(duì)照組、IR組和加貝酯組缺血再灌注后2小時(shí)大鼠血清中細(xì)胞因子TNF-a分別為:25.60±2.58 pg/ml、73.49±24.90 pg/ml、42.2

5、3±13.48 pg/ml,各組經(jīng)檢驗(yàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p<0.05。大鼠血清中細(xì)胞因子IL-6分別為:16.31±3.13 pg/ml70.23±23.70 pg/ml34.69±13.56 pg/ml,各組經(jīng)檢驗(yàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p<0.05。(3)對(duì)照組、IR組和加貝酯組缺血再灌注后2小時(shí)大鼠腸組織中的MDA含量分別為:3.20±0.73nmol/mgprot、10.47±1.30nmol/mgprot、4.96±0.82nmol/mgp

6、rot,各組經(jīng)檢驗(yàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p<0.05。
　　結(jié)論：
　　(l)加貝酯能有效減輕大鼠腸缺血再灌注所致的小腸粘膜病理?yè)p傷程度:小腸粘膜絨毛的壞死程度,減少絨毛脫落,減少中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn),減輕粘膜內(nèi)出血,減少潰瘍形成。
　　(2)加貝酯可抑制缺血再灌注后脂質(zhì)氧化反應(yīng),降低大鼠小腸組織MDA含量,對(duì)小腸缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。
　　(3)加貝酯能減少大鼠小腸缺血再灌注損傷促炎細(xì)胞因子 TNF-a、IL-6的釋放