羅庫溴銨及共注射劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、羅庫溴銨(Rocuronium Bromide Bromide)是新型中效非去極化肌松藥，該藥起效快且體內(nèi)無蓄積作用、對(duì)心血管系統(tǒng)抑制作用弱、不升高眼內(nèi)壓和顱內(nèi)壓、無類過敏反應(yīng)、對(duì)組胺釋放小。除了能提供與琥珀膽堿相似的插管條件外，也適用于顱腦手術(shù)，眼科急診手術(shù)及腎功不全患者的麻醉，是目前最好的肌松藥。
　　 對(duì)藥品進(jìn)行質(zhì)量控制是保證藥品安全有效的基礎(chǔ)和前提，為達(dá)到質(zhì)量的有效控制，需要從多角度、多層面來控制藥品質(zhì)量。本研究建立了羅

2、庫溴銨及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)其分析方法進(jìn)行了科學(xué)性、準(zhǔn)確性和可行性評(píng)價(jià)，對(duì)確保產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定與安全有效具有重要意義。
　　 主要研究分為三部分：
　　 1.羅庫溴銨結(jié)構(gòu)確證
　　 目的：對(duì)新合成的羅庫溴銨進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn)，確保目標(biāo)產(chǎn)物的正確性，以保證藥學(xué)、藥理、毒理和臨床等各項(xiàng)研究順利進(jìn)行。
　　 方法：采用紫外吸收光譜(UV)、紅外吸收光譜(IR)、高分辨率質(zhì)譜(HRMS)、核磁共振氫譜(1H-NMR)、

3、碳譜(13C-NMR)、X-射線粉末衍射(X-RPD)及差示掃描量熱(DSC)等分析測(cè)試方法得到的相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證及綜合解析。
　　 結(jié)果：采用紫外吸收光譜(UV)、紅外吸收光譜(IR)、高分辨率質(zhì)譜(HRMS)、核磁共振氫譜(1H-NMR)、碳譜(13C-NMR)、X-射線粉末衍射(X-RPD)及差示掃描量熱(DSC)等分析測(cè)試方法確定供試品與羅庫溴銨結(jié)構(gòu)一致。
　　 結(jié)論：新合成的化學(xué)物質(zhì)為羅庫溴銨。
　　

4、 2.羅庫溴銨質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的方法學(xué)研究
　　 目的：研究羅庫溴銨的性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等方法，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供理論依據(jù)。
　　 方法：(1)性狀：對(duì)外觀、引濕性、溶解度、熔點(diǎn)及比旋度進(jìn)行測(cè)定。(2)鑒別：分別采用化學(xué)法、紅外分光光度法對(duì)其進(jìn)行鑒別。(3)檢查：按照《中國藥典》（2010年版）二部附錄一般雜質(zhì)的檢查法對(duì)本品的酸堿度、溶液的澄清度與顏色、水分、熾灼殘?jiān)?、重金屬、砷鹽等進(jìn)行檢查：有關(guān)物質(zhì)采用高效液相色

5、譜法測(cè)定；有機(jī)溶劑殘留量對(duì)甲醇、正戊烷、乙醚、丙酮、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸異丁酯的殘留量進(jìn)行考察。(4)含量測(cè)定：采用容量法中非水酸堿滴定法測(cè)量本品含量。a．溶液穩(wěn)定性：取樣品溶液分別放置4小時(shí)后測(cè)定樣品含量并計(jì)算RSD值。b．靈敏度試驗(yàn)：將預(yù)饋值改為0ml，逐步減小羅庫溴銨的稱樣量，對(duì)樣品進(jìn)行滴定，觀察滴定終點(diǎn)突躍，檢測(cè)該法靈敏度。c．重復(fù)性試驗(yàn)：精密稱取羅庫溴銨各6份約0.35g，分別置于滴定杯中，照含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定并計(jì)

6、算RSD值。d.中間精密度試驗(yàn)：取同一批樣品，由3名不同試驗(yàn)者在不同時(shí)間內(nèi)、采用不同廠家的色譜柱，測(cè)定羅庫溴銨的含量并計(jì)算RSD值。e．回收率試驗(yàn)：精密稱取羅庫溴銨對(duì)照品約0.28g、0.35g、0.42g（分別相當(dāng)于測(cè)定濃度的80％、100％、120％）各三份按含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定并計(jì)算回收率。f．依據(jù)上述含量測(cè)定方法，測(cè)定羅庫溴銨含量。
　　 結(jié)果：(1)性狀：羅庫溴銨為類白色粉末，無臭，具有引濕性；在三氯甲烷中極易溶，在N

7、，N-二甲基甲酰胺、無水乙醇、水、乙腈中易溶，在乙醚中幾乎不溶；熔點(diǎn)161～169℃；比旋度+28.5°～+32.0°(0.1mol/L鹽酸溶液)；(2)鑒別：采用化學(xué)法用以鑒別溴離子，反應(yīng)生成淡黃色凝乳狀沉淀，沉淀在氨試液中微溶，但在硝酸中幾乎不溶；紅外光譜中供試品與對(duì)照品吸收光譜一致；高效液相色譜圖中供試品溶液主峰和對(duì)照品溶液主峰保留時(shí)間一致。(3)檢查：依法對(duì)酸堿度、溶液的澄清度與顏色、水分、熾灼殘?jiān)⒅亟饘?、砷鹽等一般雜質(zhì)進(jìn)行檢

8、查均符合規(guī)定；有關(guān)物質(zhì)采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。a．系統(tǒng)適用性：理論板數(shù)按羅庫溴銨峰計(jì)算應(yīng)不低于7000。b．檢測(cè)波長定為207nm。c．專屬性試驗(yàn)：羅庫溴銨經(jīng)熱、酸、堿、氧化、強(qiáng)光破壞后，所產(chǎn)生的降解產(chǎn)物與主成分的峰完全分離，說明該方法專屬性強(qiáng)。d．靈敏度：采用逐步稀釋法測(cè)定，以S/N=3時(shí)，羅庫溴銨及雜質(zhì)Ⅰ～V的檢測(cè)限，分別為18、12、19、18、20、11ng。e．有關(guān)物質(zhì)及殘留溶劑的結(jié)果均符合規(guī)定。(4)含量測(cè)定：采用非水酸

9、堿滴定法測(cè)定本品的含量。a．溶液穩(wěn)定性：本品在4小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定且RSD0.03％。b．線性相關(guān)性考察：回歸方程：V=16.3326W-0.0016(r=0.9999)，表明羅庫溴銨在0.1501g～0.4013g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。c．靈敏度：1.71mg。d．重復(fù)性試驗(yàn)：平均含量為99.7％，RSD為0.1％。表明該方法的重復(fù)性良好。e．中間精密度試驗(yàn)：取同一批樣品，由3名不同試驗(yàn)者在不同時(shí)間內(nèi)測(cè)定羅庫溴銨的含量，結(jié)果平均含量為99.7％

10、，RSD為0.2％，結(jié)果表明，本方法中間精密度良好。f回收率試驗(yàn)：精密稱取羅庫溴銨對(duì)照品約0.28g、0.35g、0.42g(分別相當(dāng)于測(cè)定濃度的80％、100％、120％)各三份按含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定并計(jì)算回收率，樣品的回收率分別為99.9％、100.0％、100.0％;RSD為0.1％。依據(jù)上述含量測(cè)定方法，羅庫溴銨含量為分別為：99.8％，99.6％，99.9％。
　　 結(jié)論：通過對(duì)羅庫溴銨的性狀、鑒別、有關(guān)物質(zhì)及含量測(cè)定

11、方法的全面研究，建立了一整套操作簡便、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確的藥物分析方法，為羅庫溴銨質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了科學(xué)的依據(jù)。
　　 3.羅庫溴銨注射劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　 目的：通過對(duì)羅庫溴銨注射液的性狀、鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定及配伍試驗(yàn)的研究，為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供理論依據(jù)。
　　 方法：(1)性狀：采用目視法對(duì)羅庫溴銨注射液的外觀性狀進(jìn)行了測(cè)定。(2)鑒別：分別采用薄層色譜法和高效液相色譜法對(duì)其進(jìn)行鑒別。(3)雜質(zhì)檢

12、查：按照《中國藥典》（2010年版）二部附錄注射劑通則中一般雜質(zhì)檢查法對(duì)本品的pH值、溶液的澄清度與顏色、可見異物、不溶性微粒等進(jìn)行檢查；有關(guān)物質(zhì)采用高效液相色譜法測(cè)定；(4)含量測(cè)定：采用高效液相色譜法。a．溶液穩(wěn)定性：取樣品溶液放置24小時(shí)后測(cè)定樣品主峰峰面積并計(jì)算RSD值。b．線性相關(guān)性考察：配制一系列濃度的羅庫溴銨對(duì)照品溶液，測(cè)定峰面積：以羅庫溴銨的含量為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。c．定量限：將羅庫溴銨對(duì)照品溶

13、液逐步稀釋，當(dāng)信噪比S/N≥10，此時(shí)濃度即為定量限。d．重復(fù)性試驗(yàn)：取羅庫溴銨注射液按含量測(cè)定方法平行制備樣品溶液6份，分別測(cè)定含量并計(jì)算RSD值。e．回收率試驗(yàn)：精密稱取羅庫溴銨對(duì)照品，分別置于50ml量瓶中，按處方配制樣品溶液，用流動(dòng)相溶液配制成測(cè)定濃度的80％、100％、120％的溶液各三份，按已確定的色譜條件進(jìn)行分析，計(jì)算回收率。g．樣品測(cè)定：按已確定方法，測(cè)定羅庫溴銨注射液含量。
　　 結(jié)果：(1)羅庫溴銨注射液為微

14、黃色的澄明液體；(2)鑒別：TLC鑒別試驗(yàn)表明供試品溶液所顯示主斑點(diǎn)的位置、顏色、大小與羅庫溴銨對(duì)照品溶液相同；HPLC法色譜圖中供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液主峰保留時(shí)間一致。(3)檢查：依法對(duì)pH值、溶液的澄清度與顏色、可見異物、不溶性微粒等一般雜質(zhì)進(jìn)行檢查均符合規(guī)定；有關(guān)物質(zhì)采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。a．系統(tǒng)適用性：理論板數(shù)按羅庫溴銨峰計(jì)算應(yīng)不低于7000。b．分離度：主峰與相鄰雜質(zhì)、輔料、溴分離度良好。c．專屬性試驗(yàn)：空

15、白試驗(yàn)表明輔料及溶劑均不干擾測(cè)定；另將供試品經(jīng)熱、酸、堿、氧化、強(qiáng)光破壞后，所產(chǎn)生的降解產(chǎn)物也均與主成分峰完全分離，說明該方法專屬性強(qiáng)。d．重復(fù)性試驗(yàn)：雜質(zhì)Ⅲ的平均含量為0.2％，RSD為1.5％；其他雜質(zhì)均未檢出，可見該方法重復(fù)性良好。e．溶液穩(wěn)定性：供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。(4)含量測(cè)定：a．溶液穩(wěn)定性：本品在24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，其RSD為0.6％。b．線性相關(guān)性考察：回歸方程：A=1951.63C+19.58，r=0.9999。表

16、明羅庫溴銨在0.2008～2.006mg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。c．定量限為：20.1ng。d．重復(fù)性試驗(yàn)：平均含量為99.7％，其RSD為0.4％。e．回收率試驗(yàn)：精密稱取羅庫溴銨對(duì)照品，分別置于50ml量瓶中，按處方配制樣品溶液，用流動(dòng)相制成測(cè)定濃度的80％、100％、120％的樣品溶液，按含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析，計(jì)算回收率，樣品的平均回收率分別為99.7％，99.8％，99.9％;RSD值為0.1％。結(jié)果表明，該方法回