RNA編輯酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反應(yīng)及人肝癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、本研究分為兩部分，分別從移植排斥反應(yīng)和肝癌這兩個(gè)肝膽外科目前的熱點(diǎn)領(lǐng)域入手，探索大鼠肝移植排斥反應(yīng)以及人肝癌、癌旁組織中RNA編輯酶ADAR1的表達(dá)變化及意義。 第一部分：探索大鼠肝移植排斥反應(yīng)中RNA編輯酶ADAR1的表達(dá)變化以及意義。 研究方法：健康成年雄性SD大鼠和Wistar大鼠105只，體重200-250g，受體體重略大于供體；由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng)條件符合SPF動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)分為4組：(1)非排

2、斥組(n=15)：取Wistar大鼠的肝臟原位移植給Wistar大鼠；(2)排斥反應(yīng)組(n=15)：取SD大鼠的肝臟移植給Wistar大鼠；(3)抗排斥反應(yīng)組(n=15)：取SD大鼠的肝臟移植給Wistar大鼠，術(shù)后肌注FK506(2mg/kg/d)；(4)對(duì)照組(n=15)：對(duì)Wistar大鼠不行肝移植，僅行開關(guān)腹手術(shù)。根據(jù)Kamada報(bào)道的術(shù)式加以多項(xiàng)技術(shù)改進(jìn)建立大鼠原位肝移植模型。各組又隨機(jī)分為3、5、7d三個(gè)時(shí)相點(diǎn)，每個(gè)時(shí)相點(diǎn)各

3、處死5只，即時(shí)活殺大鼠取脾臟組織。切除后立即取100mg標(biāo)本于-196℃液氮中凍存，同時(shí)在4％多聚甲醛保存，備做RT-PCR及病理學(xué)檢查。 研究結(jié)果：移植后不同時(shí)間點(diǎn)，排斥反應(yīng)組與非排斥組、抗排斥反應(yīng)組以及對(duì)照組比較，RNA編輯酶ADAR1表達(dá)均顯著增高，P＜0.001；FK506抑制大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)后，RNA編輯酶ADAR1升高幅度顯著下降。 提示：RNA編輯酶ADAR1在大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展中起作用

4、。 第二部分：探索人肝癌、癌旁組織中RNA編輯酶ADAR1的表達(dá)變化及意義。 研究方法：連續(xù)收集自2004年12月到2005年04月，我科手術(shù)病理證實(shí)的、未行栓塞化療的41例肝細(xì)胞肝癌患者標(biāo)本，同時(shí)收集部分對(duì)照標(biāo)本。取新鮮肝癌中最典型的癌灶部分、癌旁組織以及對(duì)照肝組織，將所有組織進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)。 研究結(jié)果：所有肝癌組織RNA編輯酶ADAR1均有表達(dá)，相對(duì)表達(dá)量為3.340±0.863；所有癌旁組織RNA編輯

5、酶ADAR1相對(duì)表達(dá)量為0.801±0.209;作為對(duì)照的26例正常肝組織及其他肝臟疾病標(biāo)本檢測(cè)到RNA編輯酶ADAR1的相對(duì)表達(dá)量為0.880±0.226。將肝癌組織和癌旁組織檢測(cè)到的ADAR1mRNA的表達(dá)量進(jìn)行成組t檢驗(yàn)，兩者間存在顯著性差異(t=18.30，P＜0.001)；將肝癌組織和對(duì)照肝組織檢測(cè)到的ADAR1mRNA的表達(dá)量進(jìn)行成組t檢驗(yàn)，兩者間亦存在顯著性差異(t=14.08，P＜0.001);將癌旁組織和對(duì)照肝組織檢測(cè)

6、到的ADAR1mRNA的表達(dá)量進(jìn)行成組t檢驗(yàn)，兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.45，P＞0.10)。將從同一患者取材的肝癌組織和癌旁組織檢測(cè)到的ADAR1mRNA的表達(dá)量進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，兩者間存在顯著性差異(t=18.53，P＜0.001)。 研究結(jié)論： 1、在大鼠原位肝移植發(fā)生急性排斥反應(yīng)時(shí)，ADAR1增高程度與排斥反應(yīng)的強(qiáng)度有明顯關(guān)系。FK506可以抑制ADAR1的表達(dá)，明顯減輕移植肝組織的急性排斥反應(yīng)。 2