BAPTA-AM誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞A2780凋亡及對GRP78表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　研究Ca2+螯合劑BAPTA-AM對人卵巢癌細(xì)胞株A2780凋亡及細(xì)胞內(nèi)GRP78表達(dá)的影響。
　　方法：
　　1.采用MTT方法檢測在不同濃度的BAPTA-AM作用下,卵巢癌細(xì)胞A2780的抑制率。
　　2.采用FCM方法檢測在不同濃度的BAPTA-AM作用下,卵巢癌細(xì)胞A2780的凋亡率。
　　3.采用RT-PCR方法檢測在不同濃度的BAPTA-AM作用下,GRP78在卵巢癌細(xì)胞A2780內(nèi)

2、核酸水平的表達(dá)。
　　4.采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)法檢測在不同濃度的BAPTA-AM作用下,GRP78在卵巢癌細(xì)胞A2780內(nèi)蛋白水平的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.MTT方法檢測結(jié)果顯示,經(jīng)0μmol/L、20mol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L的BAPTA-AM孵育卵巢癌細(xì)胞A27801h后,隨著BAPTA-AM濃度的增加,對卵巢癌細(xì)胞A2780的抑制率越來越大。
　　2.FCM方法檢測

3、結(jié)果顯示實驗組(20mol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L的BAPTA-AM)細(xì)胞的凋亡率較對照組(0μmol/L的BAPTA-AM)明顯增高,并且有一定的濃度依賴性。
　　3.RT-PCR方法檢測結(jié)果顯示實驗組(20mol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L的BAPTA-AM)和對照組(0μmol/L的BAPTA-AM)相比較,GRP78在核酸水平上表達(dá)降低。
　　4.免疫熒

4、光細(xì)胞化學(xué)法檢測結(jié)果顯示,實驗組(20mol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L的BAPTA-AM)的熒光強度較對照組(0μmol/L的BAPTA-AM)明顯減弱,而且BAPTA-AM濃度越高,熒光越弱。
　　結(jié)論：
　　1.BAPTA-AM能夠下調(diào)人卵巢癌細(xì)胞A2780中GRP78在蛋白及核酸水平表達(dá)。
　　2.BAPTA-AM能夠抑制人卵巢癌細(xì)胞A2780的增值,誘導(dǎo)A2780細(xì)胞凋亡。