miR-191及其調(diào)控的靶基因在胃癌組織中的表達.pdf

1、研究背景：
　　胃癌是國內(nèi)最常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)生、發(fā)展是多因素、多階段的過程，目前對胃癌的早期診斷除了篩查尚無其它很好的方法，因此，早期胃癌診斷率低，胃癌患者初診時以進展期的居多。胃癌的總體治療效果及預后仍較差，至今仍缺少特異性的治療靶點。因此，尋找新的腫瘤標記物，協(xié)助胃癌的早期診斷，并且為胃癌基因治療提供新的生物學靶點有著重大的臨床意義。
　　微小 RNA（miRNA）是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類小分子非編碼 RNA，

2、它在細胞增殖、凋亡、分化、周期調(diào)控以及個體發(fā)育等方面發(fā)揮著重要的作用，而且越來越多的研究發(fā)現(xiàn) miRNA在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色，不同的腫瘤中具有不同特征的miRNA，甚至可以以miRNA表達譜來作為腫瘤的診斷和預后的標志物。但關(guān)于 miRNA在胃癌中表達情況的研究報道有限。國內(nèi)外相關(guān)文獻及前期關(guān)于胃癌 miRNA表達譜的研究，已表明 miR-191與胃癌具有一定的相關(guān)性，但 miR-191在胃癌的發(fā)生進展過程中具體發(fā)揮怎

3、樣的作用以及確切分子機制目前尚不清楚。
　　目的：
　　1.初步探討 miR-191在胃癌組織中的表達及其臨床意義。
　　2.利用生物信息學軟件預測 miR-191的靶基因。
　　3.對預測的靶基因在胃癌組織中表達情況進行檢測，分析 miR-191與靶基因在胃癌組織中表達的相關(guān)性。
　　方法
　　1.選取2009年4月至2010年12月經(jīng)手術(shù)切除的原發(fā)性胃癌標本及配對癌旁正常組織標本各50例。實時熒光

4、定量 PCR(real-time quantitative PCR， qRT-PCR)方法檢測胃癌組織及癌旁組織中miR-191的相對定量，初步探討miR-191在胃癌組織和癌旁組織中的表達差異以及與胃癌臨床病理特征的相關(guān)性。
　　2.利用生物信息學軟件（MiRanda、TargetScan及PicTar）對miR-191進行靶基因預測，選取3個軟件均預測到的基因作為靶基因。
　　3. qRT-PCR方法對預測的靶基因PLC

5、D1在胃癌和配對癌旁正常組織中的表達情況進行檢測，初步探討PLCD1基因在胃癌及癌旁組織中的表達差異及與胃癌患者臨床病理特征的相關(guān)性，并初步分析 miR-191與PLCD1基因的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1.(1)在50例胃癌組織中34例（68％）miR-191呈高表達，miR-191在胃癌組織中的相對表達量是配對正常組織的2.0倍。胃癌組織中miR-191表達水平（M＝0.031）高于正常胃組織（M＝0.024），有顯著性

6、差異（P=0.015）。(2)按性別、年齡、病理組織學分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期對胃癌病人分別進行分組，各組間 miR-191表達情況均無顯著差異性(P>0.05)。
　　2. PLCD1基因在 MiRanda、TargetScan、PicTa三個軟件中均被預測為miR-191的靶基因。
　　3.(1)在30例胃癌組織中18例（60%）PLCD1 mRNA呈低表達，PLCD1 mRNA在胃癌組織中的相對表達量是配

7、對正常組織的0.372倍。胃癌組織中PLCD1 mRNA表達水平（M＝0.00041）低于正常胃組織（M＝0.00521），有顯著性差異（P=0.041）。(2)按性別、年齡、病理組織學分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期對胃癌病人分別進行分組，各組間 PLCD1 mRNA表達情況均無顯著差異性（P>0.05）。
　　4.胃癌組織中miR-191與PLCD1 mRNA表達水平存在負相關(guān)性（r=-0.370，p=0.04）。

8、>　　結(jié)論：
　　1. miR-191在胃癌組織中呈高表達，表達量與相關(guān)的臨床病理特征（性別、年齡、病理組織學分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期）無相關(guān)性。
　　2.利用生物信息學軟件預測 PLCD1為 miR-191的靶基因。
　　3. PLCD1 mRNA在胃癌組織中呈低表達，表達量與相關(guān)的臨床病理特征（性別、年齡、病理組織學分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期）無相關(guān)性。
　　4. miR-191和其