miR-191及其調(diào)控的靶基因在胃癌組織中的表達(dá).pdf

1、研究背景：
　　胃癌是國內(nèi)最常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)生、發(fā)展是多因素、多階段的過程，目前對(duì)胃癌的早期診斷除了篩查尚無其它很好的方法，因此，早期胃癌診斷率低，胃癌患者初診時(shí)以進(jìn)展期的居多。胃癌的總體治療效果及預(yù)后仍較差，至今仍缺少特異性的治療靶點(diǎn)。因此，尋找新的腫瘤標(biāo)記物，協(xié)助胃癌的早期診斷，并且為胃癌基因治療提供新的生物學(xué)靶點(diǎn)有著重大的臨床意義。
　　微小 RNA（miRNA）是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類小分子非編碼 RNA，

2、它在細(xì)胞增殖、凋亡、分化、周期調(diào)控以及個(gè)體發(fā)育等方面發(fā)揮著重要的作用，而且越來越多的研究發(fā)現(xiàn) miRNA在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的角色，不同的腫瘤中具有不同特征的miRNA，甚至可以以miRNA表達(dá)譜來作為腫瘤的診斷和預(yù)后的標(biāo)志物。但關(guān)于 miRNA在胃癌中表達(dá)情況的研究報(bào)道有限。國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)及前期關(guān)于胃癌 miRNA表達(dá)譜的研究，已表明 miR-191與胃癌具有一定的相關(guān)性，但 miR-191在胃癌的發(fā)生進(jìn)展過程中具體發(fā)揮怎

3、樣的作用以及確切分子機(jī)制目前尚不清楚。
　　目的：
　　1.初步探討 miR-191在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。
　　2.利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè) miR-191的靶基因。
　　3.對(duì)預(yù)測(cè)的靶基因在胃癌組織中表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，分析 miR-191與靶基因在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。
　　方法
　　1.選取2009年4月至2010年12月經(jīng)手術(shù)切除的原發(fā)性胃癌標(biāo)本及配對(duì)癌旁正常組織標(biāo)本各50例。實(shí)時(shí)熒光

4、定量 PCR(real-time quantitative PCR， qRT-PCR)方法檢測(cè)胃癌組織及癌旁組織中miR-191的相對(duì)定量，初步探討miR-191在胃癌組織和癌旁組織中的表達(dá)差異以及與胃癌臨床病理特征的相關(guān)性。
　　2.利用生物信息學(xué)軟件（MiRanda、TargetScan及PicTar）對(duì)miR-191進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè)，選取3個(gè)軟件均預(yù)測(cè)到的基因作為靶基因。
　　3. qRT-PCR方法對(duì)預(yù)測(cè)的靶基因PLC

5、D1在胃癌和配對(duì)癌旁正常組織中的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，初步探討PLCD1基因在胃癌及癌旁組織中的表達(dá)差異及與胃癌患者臨床病理特征的相關(guān)性，并初步分析 miR-191與PLCD1基因的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1.(1)在50例胃癌組織中34例（68％）miR-191呈高表達(dá)，miR-191在胃癌組織中的相對(duì)表達(dá)量是配對(duì)正常組織的2.0倍。胃癌組織中miR-191表達(dá)水平（M＝0.031）高于正常胃組織（M＝0.024），有顯著性

6、差異（P=0.015）。(2)按性別、年齡、病理組織學(xué)分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期對(duì)胃癌病人分別進(jìn)行分組，各組間 miR-191表達(dá)情況均無顯著差異性(P>0.05)。
　　2. PLCD1基因在 MiRanda、TargetScan、PicTa三個(gè)軟件中均被預(yù)測(cè)為miR-191的靶基因。
　　3.(1)在30例胃癌組織中18例（60%）PLCD1 mRNA呈低表達(dá)，PLCD1 mRNA在胃癌組織中的相對(duì)表達(dá)量是配

7、對(duì)正常組織的0.372倍。胃癌組織中PLCD1 mRNA表達(dá)水平（M＝0.00041）低于正常胃組織（M＝0.00521），有顯著性差異（P=0.041）。(2)按性別、年齡、病理組織學(xué)分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期對(duì)胃癌病人分別進(jìn)行分組，各組間 PLCD1 mRNA表達(dá)情況均無顯著差異性（P>0.05）。
　　4.胃癌組織中miR-191與PLCD1 mRNA表達(dá)水平存在負(fù)相關(guān)性（r=-0.370，p=0.04）。

8、>　　結(jié)論：
　　1. miR-191在胃癌組織中呈高表達(dá)，表達(dá)量與相關(guān)的臨床病理特征（性別、年齡、病理組織學(xué)分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期）無相關(guān)性。
　　2.利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè) PLCD1為 miR-191的靶基因。
　　3. PLCD1 mRNA在胃癌組織中呈低表達(dá)，表達(dá)量與相關(guān)的臨床病理特征（性別、年齡、病理組織學(xué)分型、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期）無相關(guān)性。
　　4. miR-191和其