白細(xì)胞介素-2與雌激素對C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的作用.pdf

1、第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文白細(xì)胞介素2與雌激素對C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的作用姓名：周華申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：朱運龍20020101第四軍醫(yī)大薯u一士掌口瞪文中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能具有廣泛而重要的作用。雌激素調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能往往通過雌激素受體(es廿ogenreceptor，ER)蛋白介導(dǎo)。ER屬于類固醇受體超家族的核受體，具a、D兩種亞型，此二者在各種組織分布及密度迥異。ER具核、膜雙重分布特征。雌激素的作用通過經(jīng)典的核受體通路和

2、膜受體通路來完成。星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中數(shù)量最多的一種細(xì)胞，對維持神經(jīng)系統(tǒng)正常生理功能發(fā)揮至關(guān)重要的作用。星形膠質(zhì)瘤是腦部常見惡性腫瘤之一。本次研究擬從基因與蛋白水平系統(tǒng)的證實c6大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有IL2R與ER表達，并分別初步探討IL2與雌激素對該細(xì)胞基本生理活動的影響，及其可能的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。本實驗第一部分首先觀察了IL一2R在c6細(xì)胞的表達狀況，而后觀察IL2對C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖活動的影響。第二部分觀察了ER在該細(xì)胞的表

3、達情況與E2對細(xì)胞基本生理活動的影響。本實驗采用的方法如下：1c6大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系的培養(yǎng)；2免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)：從蛋白水平檢測IL一2R與ER的表達；3westem免疫印記：檢測ER蛋白的表達；4從培養(yǎng)的C6細(xì)胞中提取總RNA：5將上述總RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA在進行PcR擴增，以確定是否有IL2RmRNA與ERmRNA的表達；6采用MTT法觀察IL一2與E2對細(xì)胞A490fl。處OD值的影響；7采用3HTdR摻入法檢測IL一2與E2對細(xì)