合歡對大鼠腦膠質瘤C6細胞株的增殖抑制與凋亡誘導作用.pdf

1、腦神經膠質瘤(glioma)是發(fā)生于神經元外胚層的腫瘤，占顱內腫瘤的50％左右，是顱內最常見的原發(fā)性惡性腦腫瘤，其中位生存期僅9～12個月。世界衛(wèi)生組織(WHO)1998年公布的按死亡率順序排位，惡性膠質瘤是34歲以下腫瘤患者的第2位死亡原因，是35～54歲患者的第3位死亡原因。腦神經膠質瘤的生物學特征是呈浸潤性生長，其惡性程度高，生長快，病程短，具有發(fā)病率、復發(fā)率、死亡率高和治愈率低等“三高一低”的特點，因此尋找有效的膠質瘤治療方案及

2、方法具有重要的意義。在臨床實踐中，一方面由于神經膠質瘤多發(fā)生于腦的重要功能區(qū)及其附近，與正常腦組織沒有明顯界限，手術往往難以將腫瘤全部切除或根本無法切除。另一方面，放療?？墒鼓[瘤及病灶周圍的正常組織受到放射線的損傷。因此尋找安全、有效且毒副作用小的治療神經膠質瘤的藥物就顯得十分重要。中醫(yī)中藥由于其獨特的優(yōu)勢，近年來被廣泛應用于癌癥的預防和治療。
　　本文分別對半枝蓮、萹蓄、合歡花、合歡皮、柴胡、天南星、蛇舌草、旋覆花、梔子9種中草

3、藥進行了水提、真空抽濾、減壓濃縮，然后將濃縮后的組分進行冷凍干燥，即得它們的水提物。以得到的干物質對大鼠腦膠質瘤C6細胞株進行細胞增殖活性檢測，結果顯示:上述粗提物中，僅合歡花、合歡皮兩種水提物能較好地抑制C6細胞的增殖?；谏鲜鰧嶒炇聦?，我們進一步研究了合歡花、合歡皮兩種水提物對C6細胞株的凋亡誘導作用及對細胞周期分布的影響，并對合歡皮粗提物進行了萃取分離，以尋找有效抗癌組分。所得結論如下:
　　1.合歡花、合歡皮兩種藥物的水提

4、物均可抑制C6細胞的增殖，且對C6細胞的增殖抑制作用具有量效和時效依賴關系。合歡花水提物在24h、48h、72h時，對C6細胞的半數抑制率(IC50)分別為:305μg/mL、145μg/mL、15μg/mL;合歡皮水提物在24h、48h、72h時，對C6細胞的半數抑制率(IC50)分別為:265μg/mL、195μg/mL、95μg/mL。
　　2.合歡花、合歡皮兩種藥物的水提物均可誘導C6細胞發(fā)生細胞凋亡。與對照組細胞相比，濃

5、度分別是200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL的合歡花水提物處理C6細胞24 h后，細胞凋亡率分別增加了1.4％、3.4％、13.3％;濃度分別是200μg/mL、250μg/mL的合歡皮水提物處理C6細胞24h后，細胞凋亡率分別增加了2.1％、13.7％。
　　3.合歡花、合歡皮兩種藥物的水提物均可使C6細胞發(fā)生S期阻滯。濃度是300μg/mL、400μg/mL的合歡花水提物處理C6細胞24h后，S期細胞比例由對照

6、組的32.169％分別增加到46.990％、49.623％;濃度是300μg/mL、400μg/mL的合歡皮水提物處理C6細胞24h后，S期細胞比例由對照組的30.107％分別增加到39.910％、45.395％。
　　4.依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇對合歡皮粗提物進行了萃取分離，分別將冷凍干燥后的合歡皮粗提物、石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相以及殘留水相6類組分對C6細胞進行細胞增殖活性檢測，檢測結果顯示:僅殘留水