P21蛋白亞細胞定位在TGF-β1誘導人支氣管上皮細胞凋亡中的研究.pdf

1、背景:
　　P21蛋白是一種廣泛細胞周期抑制蛋白，能夠調(diào)節(jié)細胞周期，隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)其還可以參與細胞衰老、凋亡、分化等。有研究證實其胞漿胞核定位與細胞凋亡關(guān)系密切，在胞漿和胞核中的表達有不一樣的功能，作用途徑也不一樣。在胞核中過度表達能夠促進細胞凋亡，而在胞漿中過度表達抑制細胞凋亡。
　　人支氣管上皮細胞是氣道的第一道屏障，其能夠?qū)獾榔鸨Ｗo作用，同時能夠分泌一些保護性細胞因子，其凋亡與抗凋亡機制不平衡參與許多肺部疾病發(fā)

2、生和發(fā)展，如COPD、哮喘、肺纖維化、急性肺損傷等。
　　TGF-β1是一種多功能的細胞因子，參與細胞生長、分化、細胞周期、凋亡等。文獻報道能刺激肺上皮細胞凋亡，同時P21蛋白表達增加，P21蛋白表達增高又有保護TGF-β1導致的肺上皮細胞的凋亡，但鮮有研究TGF-β1與p21亞細胞定位的關(guān)系，本研究探討TGF-β1誘導細胞凋亡是否與p21亞細胞定位的關(guān)系。
　　目的:
　　研究P21蛋白胞漿、胞核亞細胞定位差異在TG

3、F-β1誘導人支氣管上皮細胞系16HBE凋亡中的關(guān)系。
　　方法:
　　用TGF-β1刺激16HBE細胞，建立細胞凋亡模型，再分別提取胞漿胞核蛋白，用western blot半定量的方法研究P21蛋白在細胞漿和細胞核中亞細胞分布情況。
　　結(jié)果:
　　1、TGF-β1在不同濃度下(0.3ng/ml，1ng/ml，3ng/ml，10ng/ml，33 ng/ml)、在刺激時間為(12h，24h，48h)時能誘導16H

4、BE細胞凋亡，在濃度≤10ng/ml、時間≤24h時，隨著濃度增大和時間延長16HBE細胞凋亡增高，而在刺激時間48h或TGF-β1濃度33ng/ml時晚期凋亡和死亡細胞明顯增多。
　　2、在TGF-β1濃度為(3ng/ml、10ng/ml)，刺激24小時后p21蛋白胞漿胞核中表達均比無TGF-β1組明顯增高(p＜0.05);而TGF-β1在不同濃度(3ng/ml，10ng/ml)刺激下，胞核p21蛋白表達無差異(p＞0.05);