P21蛋白亞細(xì)胞定位在TGF-β1誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞凋亡中的研究.pdf

1、背景:
　　P21蛋白是一種廣泛細(xì)胞周期抑制蛋白，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)其還可以參與細(xì)胞衰老、凋亡、分化等。有研究證實(shí)其胞漿胞核定位與細(xì)胞凋亡關(guān)系密切，在胞漿和胞核中的表達(dá)有不一樣的功能，作用途徑也不一樣。在胞核中過(guò)度表達(dá)能夠促進(jìn)細(xì)胞凋亡，而在胞漿中過(guò)度表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡。
　　人支氣管上皮細(xì)胞是氣道的第一道屏障，其能夠?qū)獾榔鸨Ｗo(hù)作用，同時(shí)能夠分泌一些保護(hù)性細(xì)胞因子，其凋亡與抗凋亡機(jī)制不平衡參與許多肺部疾病發(fā)

2、生和發(fā)展，如COPD、哮喘、肺纖維化、急性肺損傷等。
　　TGF-β1是一種多功能的細(xì)胞因子，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、細(xì)胞周期、凋亡等。文獻(xiàn)報(bào)道能刺激肺上皮細(xì)胞凋亡，同時(shí)P21蛋白表達(dá)增加，P21蛋白表達(dá)增高又有保護(hù)TGF-β1導(dǎo)致的肺上皮細(xì)胞的凋亡，但鮮有研究TGF-β1與p21亞細(xì)胞定位的關(guān)系，本研究探討TGF-β1誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是否與p21亞細(xì)胞定位的關(guān)系。
　　目的:
　　研究P21蛋白胞漿、胞核亞細(xì)胞定位差異在TG

3、F-β1誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞系16HBE凋亡中的關(guān)系。
　　方法:
　　用TGF-β1刺激16HBE細(xì)胞，建立細(xì)胞凋亡模型，再分別提取胞漿胞核蛋白，用western blot半定量的方法研究P21蛋白在細(xì)胞漿和細(xì)胞核中亞細(xì)胞分布情況。
　　結(jié)果:
　　1、TGF-β1在不同濃度下(0.3ng/ml，1ng/ml，3ng/ml，10ng/ml，33 ng/ml)、在刺激時(shí)間為(12h，24h，48h)時(shí)能誘導(dǎo)16H

4、BE細(xì)胞凋亡，在濃度≤10ng/ml、時(shí)間≤24h時(shí)，隨著濃度增大和時(shí)間延長(zhǎng)16HBE細(xì)胞凋亡增高，而在刺激時(shí)間48h或TGF-β1濃度33ng/ml時(shí)晚期凋亡和死亡細(xì)胞明顯增多。
　　2、在TGF-β1濃度為(3ng/ml、10ng/ml)，刺激24小時(shí)后p21蛋白胞漿胞核中表達(dá)均比無(wú)TGF-β1組明顯增高(p＜0.05);而TGF-β1在不同濃度(3ng/ml，10ng/ml)刺激下，胞核p21蛋白表達(dá)無(wú)差異(p＞0.05);