骨碎補(bǔ)水提液和柚皮苷對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞的影響.pdf

1、為了探討骨碎補(bǔ)及其主要有效成分柚皮苷對(duì)機(jī)體骨骼代謝的影響，本研究采取二次酶消化法，以新生24 h大鼠的顱骨為材料分離培養(yǎng)成骨細(xì)胞，經(jīng)形態(tài)觀察(瑞氏染色)、ALP染色和鈣化結(jié)節(jié)(茜素紅、Von Kossa)染色鑒定后，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。以細(xì)胞培養(yǎng)液中不加藥物的試驗(yàn)組作為空白對(duì)照，采用MTT法、PNPP法及酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)分別檢測不同濃度的骨碎補(bǔ)水提液(10mg/mL、1 mg/mL、1.0×10<'-1>mg/mL、1.0×1

2、0<'-2>mg/mL、1.0×10<'-3>mg/mL、1.0×10<'-4>mg/mL、1.0×10<'-5>mg/mL)及柚皮苷(1.0×10<'-4>mol/L、1.0×10<'-5>mol/L、1.0×10<'-6>mol/L、1.0×10<'-7>mol/L)對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠第三代成骨細(xì)胞增殖、分化功能及細(xì)胞分泌IGF-I水平的影響。結(jié)果表明： 1．骨碎補(bǔ)水提液及柚皮苷分別作用于體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞48 h和72

3、h后，二者能明顯促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖。作用48 h，較高濃度的骨碎補(bǔ)水提液組和柚皮苷組對(duì)成骨細(xì)胞有較強(qiáng)的促增殖作用；作用72 h，骨碎補(bǔ)水提液和柚皮苷各濃度組均能顯著促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，其作用比48 h佳。 2．骨碎補(bǔ)水提液和柚皮苷作用于體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞48 h后，與對(duì)照組相比，中濃度(1.0×10<'-3>mg/mL、1.0×10<'-2>mg/mL)的骨碎補(bǔ)水提液能夠使成骨細(xì)胞ALP活性顯著升高(P<0.05)，從而促進(jìn)成