內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路對(duì)糖尿病血糖波動(dòng)下大鼠海馬神經(jīng)元的作用.pdf

1、目的：
　　1.建立實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠血糖波動(dòng)模型,并維持血糖波動(dòng)狀態(tài);2.探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路對(duì)于血糖波動(dòng)狀態(tài)下大鼠海馬神經(jīng)元的影響,尋求波動(dòng)血糖加重糖尿病腦病可能的發(fā)病機(jī)制,為臨床治療和預(yù)防糖尿病并發(fā)癥提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　10周齡健康雄性SD大鼠采用1％STZ腹腔注射法建立實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠模型,將成模組隨機(jī)分為波動(dòng)高血糖組(IHG)和持續(xù)高血糖組(SHG),另設(shè)立窩別、鼠齡、體質(zhì)量等條件匹配的正常對(duì)照組(C

2、)。波動(dòng)組每日2次定時(shí)予以皮下注射胰島素和(或)葡萄糖灌胃,并根據(jù)血糖水平及時(shí)調(diào)整用量;持續(xù)組及正常組以相同給藥手法予以等體積生理鹽水。每周一次測(cè)一日內(nèi)5點(diǎn)血糖水平,計(jì)算每日血糖水平平均值(MBG)、每日血糖平均水平的標(biāo)準(zhǔn)差(SDBG)和最大血糖波動(dòng)幅度(LAGE),衡量各組血糖穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)造模6周后大鼠處死,腹主動(dòng)脈取血,離心血清保存;取腦組織分別置入2.5%戊二醛溶液、4%多聚甲醛溶液和-80℃冰箱。分別采用試劑盒法檢測(cè)血清中丙二醛

3、(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力;電鏡下觀察海馬神經(jīng)元亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化;免疫組化法檢測(cè)海馬組織中IRE1、Bcl-2、8-OHd表達(dá)量;TUNEL法檢測(cè)各種大鼠神經(jīng)元凋亡情況及westernblot法檢測(cè)CHOP、GRP78的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　成模后,和C組相比IHG組和SHG組大鼠活動(dòng)顯著減少,毛色雜亂,精神萎靡,進(jìn)食水、尿量明顯增多,死亡率上升,其中IHG組大鼠死亡率較SHG組高。IHG組和SHG組血糖穩(wěn)

4、定性遠(yuǎn)低于C組,2組SDBG、LAGE均較C組顯著上升,MBG下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與SHG組相比,IHG組SDBG、LAGE顯著升高,MBG有所降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與SHG組相比,IHG組亞細(xì)胞器形態(tài)學(xué)改變明顯,線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器不同程度腫脹,細(xì)胞器內(nèi)存在大量空泡,部分結(jié)構(gòu)不完整,細(xì)胞器膜破裂、溶解;IHG組IRE1、CHOP、GRP78表達(dá)及MDA含量均增高,Bcl-2表達(dá)下調(diào),SOD活