白花蛇舌草可吸收成分測定及其對膠原誘導性關節(jié)炎大鼠模型的影響.pdf

1、目的：擬采用超高效液相色譜-光電二極管陣列(UPLC-PDA)法檢測白花蛇舌草化學成分的含量以及經胃入血的可吸收成分，并探討血漿中可吸收成分對類風濕性關節(jié)炎大鼠模型的治療作用。
　　方法：①采用UPLC-PDA法測定白花蛇舌草中成分的含量。繪制各成分的標準曲線，并對精密度、回收率、樣本穩(wěn)定性和重現(xiàn)性進行驗證。②比較空白對照組血漿，阿魏酸、對香豆酸對照品與白花蛇舌草溶液灌胃SD大鼠血漿樣本的紫外光譜圖及色譜圖，測定該兩種成分是否被S

2、D大鼠吸收入血。③分別用低中高劑量阿魏酸干預膠原誘導性關節(jié)炎(CIA)模型大鼠，用酶聯(lián)免疫吸附劑測定法(ELISA)測定血清中TNF-α和IL-1β的含量，篩選阿魏酸高中低三個劑量中最佳干預劑量。④以篩選出的阿魏酸劑量為干預措施，從CIA大鼠的一般情況、關節(jié)炎指數、足爪腫脹度、關節(jié)滑膜組織病理改變及關節(jié)X線攝片，以及血清IL-1β、TNF-α水平多個方面，進一步探討阿魏酸治療類風濕性關節(jié)炎的作用。
　　結果：⑴白花蛇舌草中阿魏酸、

3、對香豆酸成分色譜峰獲得分離，阿魏酸線性范圍0.005-0.08 mg/ml(R2=0.9994)，平均加樣回收率為100.40％，相對標準差(RSD)為1.26％;對香豆酸線性范圍0.0028-0.045mg/ml(R2=0.9998)，平均加樣回收率為99.86％，相對標準差(RSD)為2.41％。測得白花蛇舌草生藥中阿魏酸含量為233ng/mg，對香豆酸為529ng/mg；⑵在灌胃白花蛇舌草SD大鼠血漿中測得阿魏酸、對香豆酸兩種成份

4、；⑶低、中、高劑量的阿魏酸，均能不同程度地下調CIA大鼠血清IL-1β、TNF-α水平，但以高劑量阿魏酸下調幅度最為明顯差異有顯著性。⑷以高劑量阿魏酸干預CIA大鼠。一般情況觀察:模型組大鼠精神委靡，飲食、活動減少，后期可見毛發(fā)枯燥等癥狀;阿魏酸治療組，在治療2周后上述情況改善，正常組大鼠則未出現(xiàn)上述表現(xiàn)。體質量增長變化情況:模型組與治療組較正常組大鼠體重增長緩慢;治療3周后，治療組大鼠體質量增長較模型組明顯(P＜0.05)。關節(jié)炎指數

5、評分:在實驗的前4周，模型組、治療組大鼠關節(jié)炎指數積分逐漸增加，在第21天左右達到高峰;在第35天、42天時，治療組大鼠關節(jié)炎指數明顯低于模型組(P＜0.01)。足爪腫脹度檢測:模型組大鼠足爪厚度較正常組明顯增加(P＜0.01)，并逐漸上升;治療組大鼠足爪厚度，在治療3周后與模型組比較明顯減少(P＜0.01)。關節(jié)X線攝片觀察:免疫后14天左右，模型組大鼠踝關節(jié)周圍組織腫脹，隨著病程延長，足趾關節(jié)出現(xiàn)明顯骨侵蝕病灶、關節(jié)間隙狹窄及融合等

6、表現(xiàn)。治療4周后，治療組大鼠關節(jié)周圍組織腫脹程度減低，骨質破壞程度減弱。HE染色病理學觀察:模型組滑膜組織可見炎性細胞浸潤、大量新生血管、滑膜增厚等病理特征;治療組新生血管及炎癥細胞浸潤減少，滑膜輕度增厚。血清IL-1β、TNF-α水平:在第28天、42天時，模型組、治療組大鼠血清IL-1β、TNF-α水平較正常組明顯升高(P＜0.01)，但治療組大鼠血清IL-1β、TNF-α水平明顯低于模型組(P＜0.01)。
　　結論：①采用