Perilipin基因在鼠脂肪組織中的表達(dá)及匹格列酮、TNF-α對(duì)該基因表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分 目的：探討匹格列酮和TNF-α對(duì)3T3-L1細(xì)胞perilipin mRNA表達(dá)的影響及其時(shí)間效應(yīng)。 方法：用匹格列酮 (100umol/l)和TNF-α(100ng/ml)分別處理未分化、分化過程中和分化成熟后的3T3-L1細(xì)胞，RT-PCR檢測(cè)不同干預(yù)時(shí)間perilipin mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果： (1)未分化3T3-L1細(xì)胞中perilipin未見表達(dá)，分化過程中細(xì)胞perilipin mR

2、NA的表達(dá)水平隨時(shí)間遞增。(2)在分化過程中和分化成熟的3T3-L1細(xì)胞中，匹格列酮都可明顯增加perilipin mRNA的表達(dá)(P<0.01)，干預(yù)分化過程中細(xì)胞8d和成熟后細(xì)胞24h效應(yīng)最強(qiáng)。(3)在分化過程中和分化成熟的3T3-L1細(xì)胞中，TNF-α都可明顯抑制perilipin mRNA的表達(dá)(P<0.001)，干預(yù)成熟細(xì)胞72h效應(yīng)最強(qiáng)。(4)與對(duì)照組相比，100umol/L匹格列酮、100ng/ml TNF-α及二者共同干

3、預(yù)分化成熟后3T3-L1脂肪細(xì)胞48h，perilipin mRNA水平分別增加78％、減低78％、36％。 結(jié)論：隨分化成熟，3T3-L1細(xì)胞perilipin mRNA表達(dá)量逐漸增加；匹格列酮能明顯增加3T3-L1脂肪細(xì)胞的perilipin mPGqA表達(dá)，TNF-α則明顯抑制其表達(dá)；匹格列酮能抵抗TNF-α對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞perilipin mRNA表達(dá)的抑制作用。 第二部分 目的：觀察匹格列酮對(duì)高

4、脂飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠perilipin mRNA表達(dá)的影響，探討匹格列酮改善肥胖大鼠胰島素敏感性的機(jī)制。 方法：將6周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、肥胖組、治療組，每組各15只。肥胖組和治療組以高脂飲食喂飼12周，以制備肥胖模型，對(duì)照組予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)；治療組喂飼12周后予以匹格列酮10 mg/kg·d灌胃4周，余兩組灌喂等體積溶劑。于實(shí)驗(yàn)過程中第12、16周時(shí)取空腹血測(cè)游離脂肪酸(FFA)、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、甘油三

5、酯(TG)等。采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠脂肪組織中perilipin基因的mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果： (1)高脂飼養(yǎng)12周后，與對(duì)照組相比，肥胖組呈現(xiàn)肥胖，TNF-a、 FFA、FINS和TG均明顯升高，HOMA-IR明顯增加，P值均<0.05；飼養(yǎng)18周后，肥胖組脂肪組織perilipin mRNA表達(dá)水平輕度升高，P值>0.05。(2)匹格列酮干預(yù)4周后，與肥胖組相比，治療組大鼠脂肪組織perilipin mRNA表達(dá)水平