Fas-FasL、MAPK在納洛酮保護(hù)大鼠心肌缺血再灌注損傷中的作用.pdf

1、目的：研究Fas/FasL、MAPK在納洛酮保護(hù)大鼠心肌缺血再灌注損傷中的作用。
　　 方法：雄性SD大鼠，水合氯醛350mg/kg腹腔麻醉。結(jié)扎大鼠心臟冠狀動(dòng)脈左前降支(LAD)30min造成缺血，2h恢復(fù)血流灌注建立心肌缺血再灌注損傷模型。40只大鼠隨機(jī)分為5組：①假手術(shù)組(Sham)；②缺血再灌注組(IR)；③納洛酮低劑量組(Nal L):0.5mg/kg;④納洛酮中劑量組(Nal M):1mg/kg;⑤納洛酮高劑量組(N

2、al H):2mg/kg。Sham組僅穿線，不結(jié)扎LAD。各組均于再灌注前10min尾靜脈給藥，Sham組和IR組給予等體積生理鹽水。
　　 采用LMS-2B型生理信號(hào)采集系統(tǒng)檢測(cè)心電圖J點(diǎn)的改變；HE染色法在光鏡下觀察心肌組織病理形態(tài)學(xué)改變；TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡；免疫印跡方法檢測(cè)心肌組織中磷酸化JNK、p38MAPK的變化以及Fas/FasL蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.納洛酮對(duì)心肌缺血再灌注損

3、傷的大鼠心電圖J點(diǎn)的影響IR組大鼠心電圖J點(diǎn)為0.43±0.02mV，明顯高于Sham組0.02±0.01mV（P＜0.01）；Nal各劑量組J點(diǎn)均低于IR組（均P＜0.01），分別為IR組的74.4％、65.1％、48.8％，且納洛酮降低J點(diǎn)的作用呈劑量依賴性（r=-0.935，P＜0.01）。
　　 2.納洛酮對(duì)心肌缺血再灌注損傷的大鼠心肌病理學(xué)形態(tài)的影響病理學(xué)檢查顯示：Sham組大鼠心肌細(xì)胞排列整齊，著色均勻，胞膜完整，無(wú)

4、變性壞死；IR組心肌纖維排列不規(guī)則，結(jié)構(gòu)紊亂，呈波浪樣變性，心肌間質(zhì)有大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；Nal各劑量組心肌纖維排列較規(guī)則，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少。
　　 3.納洛酮對(duì)心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌組織中Fas、FasL蛋白表達(dá)的影響Western Blotting結(jié)果顯示；IR組Fas、FasL蛋白的表達(dá)顯著高于Sham組(P＜0.01)；Nal各劑量組Fas、FasL蛋白的表達(dá)均低于IR組（均P＜0.01）。
　　 4.納洛酮

5、對(duì)心肌缺血再灌注大鼠心肌組織中JNK和p38MAPK磷酸化的影響Western Blotting結(jié)果顯示：IR組p-JNK、p-p38MAPK蛋白的表達(dá)顯著高于Sham組(P＜0.01);Nal各劑量組p-JNK、p-p38MAPK蛋白的表達(dá)均低于IR組（均P＜0.01）。
　　 5.納洛酮對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷后心肌細(xì)胞凋亡的影響TUNEL結(jié)果顯示：IR組的心肌細(xì)胞凋亡率為46.92±5.50％，高于Sham組3.52±0.

6、37％（P＜0.01）。與IR組相比，Nal各組凋亡陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少，分別為IR組的55.4％、26.2％、27.6％(均P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.納洛酮可以明顯降低大鼠心肌缺血再灌注損傷后心電圖J點(diǎn)的抬高，減輕心肌的病理性損傷，產(chǎn)生保護(hù)作用；
　　 2.大鼠心肌缺血再灌注損傷上調(diào)Fas、FasL、p-JNK以及p-p38MAPK的表達(dá)。納洛酮通過(guò)下調(diào)Fas/FasL的表達(dá)，降低JNK、p38MA