腎用劑量多巴胺對(duì)家兔腎功能的影響及其與體液因素的關(guān)系.pdf

1、目的：自1964年Goldberg等報(bào)道[1]小劑量多巴(3μg·kg-1·min-1)應(yīng)用于對(duì)腎臟疾病的治療以來(lái)，“腎劑量”多巴胺(Renal-dose dopamine，RDA，是指輸入速率為0.5～5.0μg·kg-1·min-1的多巴胺)一直廣泛應(yīng)用于臨床，并成為一種重要的腎臟保護(hù)藥物。Schwartz[2]在1997年的報(bào)道中提到應(yīng)用小劑量多巴胺(3μg·kg-1·min-1)可以增加腎小球?yàn)V過(guò)率(glomerular fit

2、ration rate，GFR)和腎血流量，產(chǎn)生利尿作用，且不引起正性變力效應(yīng)，即所謂RDA具有特異性改善腎功能的作用。但目前的很多研究[3-4]都表明不能將多巴胺對(duì)腎臟發(fā)揮的作用與其對(duì)全身血流動(dòng)力學(xué)的影響區(qū)分開(kāi)來(lái)。RDA對(duì)腎臟的作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。本文通過(guò)觀察①RDA和多巴酚丁胺(dotutamine，DOB)對(duì)家兔在體腎功能的不同影響；②RDA對(duì)家兔離體灌流腎(isolated perfusedkidney，IPK)腎血管的舒張

3、效應(yīng)和腎功能的影響，進(jìn)一步探討RDA對(duì)家兔腎功能的影響及其與全身體液因素的關(guān)系，為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：①實(shí)驗(yàn)分組：研究對(duì)象為健康雄性日本大耳白兔(本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重1.5～2.5千克，共42只，分別進(jìn)行在體和離體實(shí)驗(yàn)。在體實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組(給予0.9％的氯化鈉溶液)、RDA組(給予10μg·kg-1·min-1的RDA)和DOB組(給予15μg·kg-1·min-1的DOB)。每組家兔6只，均采取

4、耳緣靜脈給藥，對(duì)比RDA和DOB對(duì)家兔尿量、尿鈉排泄分?jǐn)?shù)(fractional excretion of sodium，F(xiàn)ENa)、GFR和心率的影響，研究血液動(dòng)力學(xué)在腎功能改善中的作用。離體實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組(給予0.9％的氯化鈉溶液)、去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)組(給予不同濃度的NE)、RDA組(同時(shí)給予NE和RDA)和氟哌啶醇組(同時(shí)給予NE、RDA和氟哌啶醇)。每組家兔6只，各種物質(zhì)均在家兔離體

5、腎腎動(dòng)脈端用微量注射泵(10mL/min)注入。應(yīng)用IPK技術(shù)，觀察分別給予生理鹽水、RDA、RDA和氟哌啶醇(多巴胺受體拮抗劑)后，腎血管對(duì)NE反應(yīng)性的變化，研究RDA對(duì)腎血管的舒張作用；觀察RDA對(duì)家兔IPK中尿量、FENa、GFR和腎素分泌的影響，進(jìn)一步探討RDA對(duì)腎功能的影響及其與體液因素的關(guān)系。②在體實(shí)驗(yàn)實(shí)施：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均禁食12小時(shí)，自由飲水，用20％烏拉坦(urethane 4ml/kg)耳緣靜脈注射麻醉家兔。將家兔放入兔盒

6、中平衡穩(wěn)定20min，然后實(shí)施氣管插管，實(shí)施右頸動(dòng)脈插管以備連接生理壓力測(cè)試儀；監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)期間心率的變化；以22號(hào)套管針行耳緣靜脈穿刺置管以備輸液和給藥，輸液速率均為3mL/min，液體中菊粉濃度為1.0g/L；留置導(dǎo)尿管以備收集尿標(biāo)本。正式實(shí)驗(yàn)后，每30min收集尿樣一次，離心以備檢測(cè)。每次留尿的中點(diǎn)留取動(dòng)脈血2ml，離心后將血漿分置兩管，用于檢測(cè)菊粉濃度及其它生化指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)期間連續(xù)記錄心率的變化。以上指標(biāo)用家兔體重進(jìn)行校正。③離體實(shí)驗(yàn)

7、實(shí)施：IPK模型的建立，耳緣靜脈麻醉后，游離家兔左側(cè)輸尿管、腎動(dòng)脈、腎靜脈，并將兔腎坐在家兔腹腔內(nèi)以保持其溫度。經(jīng)輸尿管插管收集尿液，腎動(dòng)、靜脈插管進(jìn)行灌注。在腎動(dòng)脈入口處接壓力換能器與生理壓力測(cè)試儀相連。用加溫至37℃的Krebs液進(jìn)行灌注，調(diào)節(jié)灌流速率(Derfusion flow，PF)為10mL/min，灌注壓維持在13.3～18.7kPa之間，平衡20min后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。液體中菊粉濃度為0.2g/L，NE濃度分別為0.01、0.

8、1、1、10、100×10-7mol/L氟哌啶醇劑量為0.02mg·kg-1，RDA的濃度為0.4mg/L輸入速率為2.0μg·kg-1·min-1。實(shí)驗(yàn)期間連續(xù)記錄腎動(dòng)脈灌注壓(perfusion pressure，PP)的變化。每30分鐘收集尿樣一次。所得標(biāo)本均離心后以備檢測(cè)。④指標(biāo)測(cè)定：采用菊粉清除率法計(jì)算GFR；自動(dòng)生化分析儀測(cè)定尿液和灌流液鈉含量；按公式[FENa=(尿流率×尿鈉含量)/(Cin×灌流液鈉含量)×100％]計(jì)算

9、出FENa;放射免疫分析法測(cè)定IPK靜脈端液體中腎素活性(renin activity，RA)。所得結(jié)果采用SPSS 11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。各項(xiàng)指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((-x_±s)表示，兩兩比較用配對(duì)t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有顯著性。結(jié)果： 1.RDA和DOB對(duì)家兔在體腎臟機(jī)能的影響RDA組和DOB組的心率，均較對(duì)照組增快，用藥60min時(shí)，RDA組平均增加9.57％，DOB組平均增加11.

10、0％，均有顯著差異(P＜0.05)；60min時(shí)RDA組尿量和FENa分別為0.101±0.007ml·kg-1·min-1和0.833±0.009％，DOB組尿量和FENa分別為0.068±0.004ml·kg-1·min-1和0.814±0.008％，較對(duì)照組均增加(P＜0.05)，但RDA組比DOB組增加的幅度更大(P＜0.05)；60min時(shí)RDA組GFR為2.609±0.031ml·kg-1·min-1,DOB細(xì)GFR為2.6

11、26±0.102ml·kg-1·min-1，與對(duì)照組相比差異有顯著性(P＜0.05)，但兩組之間無(wú)顯著差異(P＞0.05) 2 RDA對(duì)IPK腎血管的影響腎血管對(duì)NE有良好的收縮性，并在180min內(nèi)維持生理機(jī)能。RDA對(duì)腎血管有明顯的舒張作用PP分別下降50％～70％(P＜0.05)，此效應(yīng)可被特異性DA受體拮抗劑氟哌啶醇阻斷。 3.RDA對(duì)家兔IPK尿量的影響對(duì)照組家兔尿量在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一直保持穩(wěn)定，給予生理鹽水后尿量雖略有上

12、升，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)組給藥后尿量逐漸上升，與給藥前差異顯著(P＜0.05)，用藥后60min時(shí)升高達(dá)用藥前的47.5％，后逐漸回降。 4 RDA對(duì)家兔IPK和FENa的影響對(duì)照組家兔FENa，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一直保持穩(wěn)定。應(yīng)用RDA后FENa立即上升，于60min左右達(dá)到峰值1.2％，比用藥前增加2倍(P＜0.05)。 5尿量與FENa的相關(guān)性分析將RDA組相同時(shí)間點(diǎn)尿量和尿鈉排泄分?jǐn)?shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。尿量

13、與FENa之間的相關(guān)系數(shù)(r)為0.62，統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示應(yīng)用RDA后，家兔IPK的尿量與FENa之間存在相關(guān)性(P＜0.01)。 6 RDA對(duì)家兔IPK、RA、GFR和PP的影響對(duì)照組給藥后PP略有上升，但在90min內(nèi)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。RDA組給藥后PP立即下降，60min時(shí)為12.1Kpa，與給藥前13.7Kpa差異顯著(P＜0.05)；用藥前后腎素分泌和GFR均無(wú)顯著差異。 結(jié)論： 腎劑量多巴胺可以通過(guò)減少I(mǎi)P