荷斯坦牛脊柱畸形綜合征檢測(cè)方法的研究.pdf

1、脊柱畸形綜合征(Complex vertebral malformation，CVM)，是一種發(fā)生在荷斯坦牛群中的常染色體致死性隱性遺傳病。1999年丹麥學(xué)者報(bào)道該病的發(fā)生后，許多國(guó)家紛紛報(bào)道了CVM的發(fā)生。系譜分析的結(jié)果表明，在中國(guó)荷斯坦牛群中存在一定數(shù)量的潛在CVM攜帶者。目前，已報(bào)道了幾種針對(duì)CVM的檢測(cè)方法，如微衛(wèi)星標(biāo)記法、等位基因特異性檢測(cè)法(AS-PCR)、創(chuàng)造酶切位點(diǎn)法(PCR-PIRA)等，但這些方法并不適合在中國(guó)廣泛應(yīng)

2、用。 利用MAMA-PCR技術(shù)，本文建立了一種針對(duì)CVM致病基因的檢測(cè)方法。通過(guò)AS-PCR法和序列測(cè)定驗(yàn)證，MAMA-PCR法被證明是一種準(zhǔn)確可靠的針對(duì)CVM致病基因的檢測(cè)方法。與已建立的CVM檢測(cè)法相比，MAMAPCR法的操作更簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性更高、成本更低廉。 利用MAMA-PCR檢測(cè)法，本文對(duì)中國(guó)荷斯坦種公牛進(jìn)行了群體水平的的檢測(cè)，在154頭被測(cè)個(gè)體中發(fā)現(xiàn)了24頭CVM陽(yáng)性個(gè)體，陽(yáng)性率為15.6％。本試驗(yàn)表明，在中國(guó)

3、荷斯坦種公牛中CVM攜帶者的比例可能已經(jīng)達(dá)到一個(gè)比較高的的程度，應(yīng)當(dāng)對(duì)中國(guó)荷斯坦種公牛進(jìn)行全面的檢測(cè)。 為了解決母牛樣品取樣困難的問(wèn)題，本文對(duì)利用血樣、耳組織、毛囊和體細(xì)胞進(jìn)行CVM檢測(cè)的條件進(jìn)行了摸索，建立了利用毛囊進(jìn)行CVM檢測(cè)的方法。利用毛囊對(duì)某CVM檢測(cè)陽(yáng)性公牛的女兒進(jìn)行檢測(cè)，在10頭被測(cè)個(gè)體中發(fā)現(xiàn)了7頭陽(yáng)性個(gè)體。依據(jù)本研究的結(jié)果，建議對(duì)核心群母牛進(jìn)行全面的檢測(cè)。 本實(shí)驗(yàn)建立了一種適合在中國(guó)廣泛應(yīng)用的針對(duì)荷斯坦奶