荷斯坦牛脊柱畸形綜合征檢測方法的研究.pdf

1、脊柱畸形綜合征(Complex vertebral malformation，CVM)，是一種發(fā)生在荷斯坦牛群中的常染色體致死性隱性遺傳病。1999年丹麥學者報道該病的發(fā)生后，許多國家紛紛報道了CVM的發(fā)生。系譜分析的結果表明，在中國荷斯坦牛群中存在一定數(shù)量的潛在CVM攜帶者。目前，已報道了幾種針對CVM的檢測方法，如微衛(wèi)星標記法、等位基因特異性檢測法(AS-PCR)、創(chuàng)造酶切位點法(PCR-PIRA)等，但這些方法并不適合在中國廣泛應

2、用。 利用MAMA-PCR技術，本文建立了一種針對CVM致病基因的檢測方法。通過AS-PCR法和序列測定驗證，MAMA-PCR法被證明是一種準確可靠的針對CVM致病基因的檢測方法。與已建立的CVM檢測法相比，MAMAPCR法的操作更簡單、準確性更高、成本更低廉。 利用MAMA-PCR檢測法，本文對中國荷斯坦種公牛進行了群體水平的的檢測，在154頭被測個體中發(fā)現(xiàn)了24頭CVM陽性個體，陽性率為15.6％。本試驗表明，在中國

3、荷斯坦種公牛中CVM攜帶者的比例可能已經(jīng)達到一個比較高的的程度，應當對中國荷斯坦種公牛進行全面的檢測。 為了解決母牛樣品取樣困難的問題，本文對利用血樣、耳組織、毛囊和體細胞進行CVM檢測的條件進行了摸索，建立了利用毛囊進行CVM檢測的方法。利用毛囊對某CVM檢測陽性公牛的女兒進行檢測，在10頭被測個體中發(fā)現(xiàn)了7頭陽性個體。依據(jù)本研究的結果，建議對核心群母牛進行全面的檢測。 本實驗建立了一種適合在中國廣泛應用的針對荷斯坦奶