低密度脂蛋白對胰島細胞功能和凋亡的研究.pdf

1、 目的：通過觀察低密度脂蛋白(LDL)對體外培養(yǎng)Wistar大鼠胰島細胞分泌功能的影響及誘導(dǎo)的胰島細胞凋亡作用的實驗研究，來探討低密度脂蛋白對體外培養(yǎng)胰島細胞的毒性作用及可能機制。 方法：1、以Wistar大鼠胰島細胞為對象，膠原酶分次短時間消化胰腺組織，細胞接種24小時后轉(zhuǎn)板繼續(xù)培養(yǎng)，放射免疫法檢測培養(yǎng)液中胰島素及葡萄糖刺激下胰島素分泌量，進行胰島細胞生物學(xué)活性鑒定，倒置顯微鏡下動態(tài)觀察胰島細胞生長情況。2、不同濃度LD

2、L作用體外培養(yǎng)胰島細胞48小時，放射免疫法檢測各組細胞胰島素分泌量的變化。3、采用電鏡觀測、DNA片段化檢測等方法，觀察LDL誘導(dǎo)的胰島細胞的凋亡。 結(jié)論：1、用凝膠酶反復(fù)短時間消化胰腺組織，細胞接種后及時轉(zhuǎn)板的方法可獲得純度較高、生長良好、適合實驗研究的胰島單層細胞。2、LDL對體外培養(yǎng)的大鼠胰島細胞分泌功能有一定的影響，影響程度與LDL濃度有關(guān)，表現(xiàn)為LDL抑制高糖刺激下的胰島素分泌，并且這種抑制作用隨濃度增加而加強，呈劑量依