氧化型低密度脂蛋白對樹突狀細胞功能影響的初步研究.pdf

1、目的：
　　探討氧化型低密度脂蛋白（Oxidized low density lipoprotein，OxLDL）對樹突狀細胞（Dendritic cells，DC）功能的影響，為動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）的防治提供了提供新思路及理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1．采用免疫磁珠分選技術(shù)和流式細胞儀分選技術(shù)，分選C57BL/6（H-2Kb）小鼠脾臟、動脈壁CD11c+IA/IE+DC和MHCⅡ類分子

2、限制的OVA323-339抗原肽特異的TCR轉(zhuǎn)基因小鼠OT-Ⅱ小鼠（H-2Kb）的初始CD4+CD62L+T細胞。
　　2．采用 Real-time PCR技術(shù)，檢測 DC CCAAT/增強子結(jié)合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、血紅素氧合酶1（Heme oxygenase-1,HMOX-1

3、）、Toll受體（Toll-like receptors,TLR）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、CD36和CD86基因的表達。
　　3．采用 DC與抗原肽特異性初始 CD4+CD62L+T細胞共培養(yǎng)技術(shù)和流式細胞儀技術(shù)，檢測CD4+T細胞胞內(nèi)IFN-γ和IL-17的產(chǎn)生，分析DC對T細胞分化的調(diào)控作用。
　　結(jié)果：
　　1. OxLDL促進小鼠脾臟

4、DC、動脈壁DC CHOP和Caspase-3基因的表達，觀察到 DC CHOP和Caspase-3基因的表達能被活性氧簇（Reactive oxygen species,ROS）的抑制劑N-乙酰半胱氨酸（N-Acetylcysteine，NAC）所抑制。
　　2.OxLDL促進小鼠脾臟 DC、動脈壁 DC HMOX-1基因的表達，且可以被ROS抑制劑NAC所抑制。
　　3. OxLDL能夠誘導(dǎo)小鼠脾臟DC高表達CD36、C

5、D86和eNOS基因，OxLDL也能促進DC表達TLR4，但不影響TLR2、TLR6、TLR7和TLR9的表達。
　　4．在DC與抗原肽特異性初始CD4+CD62L+T細胞共培養(yǎng)體系中，OxLDL能夠促進小鼠脾臟DC誘導(dǎo)初始CD4+CD62L+T細胞向Th17細胞分化。
　　結(jié)論：
　　1. OxLDL通過ROS依賴的途徑促進DC CHOP和Caspase-3基因的表達，同時OxLDL也可通過ROS依賴的途徑促進DC