載脂蛋白J對氧化低密度脂蛋白引起的心肌細胞損傷的影響.pdf

1、現(xiàn)如今心血管疾病頻發(fā)，已成為制約人們健康的一大難題。心血管疾病類型眾多，高頻發(fā)的疾病包括缺血性心肌病、高血壓以及動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)等。通過調(diào)查，多數(shù)的心血管疾病和AS之間均有密切的關聯(lián)。國內(nèi)外業(yè)界人士從未停止過對冠心病的研究，據(jù)最新調(diào)研結果顯示，多數(shù)不必要的活性氧自由基(reactive oxygen species，ROS)是種種冠心病產(chǎn)生因素都可以激發(fā)的，活性氧進而會產(chǎn)生誘發(fā)AS的病理過程。氧化低密

2、度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)的功能多樣，不但可損傷血管內(nèi)皮、誘發(fā)細胞產(chǎn)生細胞因子，而且會同時造成細胞凋亡。
　　載脂蛋白J(Apolipoprotein-J，ApoJ)是多存于人體組織與體液中的新型多功能分泌型的糖蛋白質。它既可參與精子成熟、組織重構、和補體活化的調(diào)控等生理病理過程，又可在細胞凋亡和脂質運輸中發(fā)揮作用。載脂蛋白J在抑制凋亡細胞方面有顯著作用，因此可保護心

3、臟受損時的細胞。但是值得注意的是，即使載脂蛋白J與ox-LDL二者之間存在的聯(lián)系對于心肌細胞的生長與死亡起著決定性的作用，仍未完全引起足夠的重視。
　　目的:闡明ox-LDL對心肌細胞的影響及細胞內(nèi)信號轉導機制，并探討高表達ApoJ是否可降低ox-LDL對新生大鼠心室肌細胞(neonatal rat ventricular cells，NRVCs)的影響。
　　方法:利用帶有ApoJ基因的腺病毒感染NRVCs使ApoJ高表達

4、。用CaMKⅡ抑制劑KN93和SOD類似物Mn(Ⅲ)TBAP進行前期預處理，劃分心肌細胞為:正常對照組、ox-LDL組、ox-LDL聯(lián)合ApoJ組、ApoJ組、ox-LDL聯(lián)合KN93組、ox-LDL聯(lián)合Mn（Ⅲ）TBAP組、H2O2組、H2O2+ApoJ組。通過MTT檢測法和Caspase-3/7活性檢測試劑盒檢測心肌細胞活性和凋亡變化;利用Western-blot檢測心肌細胞Nox2/gp91phox、P47和CaMKⅡ表達情況，利

5、用CaMKⅡ活性檢測試劑盒檢測心肌細胞CaMKⅡ活性。
　　結果:ox-LDL可引起細胞損傷，具體表現(xiàn)為caspase3/7活性增加，caspase-3的表達增強以及細胞活性下降。而APOJ高表達能夠顯著降低ox-LDL造成的細胞損傷。ox-LDL能夠增加ROS的產(chǎn)生，具體表現(xiàn)為Nox2/gp91phox和P47表達升高，而ApoJ可以抑制ox-LDL的表達。此外，APOJ高表達能夠降低ox-LDL引起的CaMKⅡ表達，同時顯著抑

6、制ox-LDL介導的CaMKⅡ活性上調(diào)。CaMKⅡ抑制劑KN93降低ApoJ抗氧化作用，阻礙APOJ對ox-LDL損傷的保護作用。活性氧清除劑(ROS)Mn(Ⅲ)TBAP也弱化了CaMKⅡ的表達和ox-LDL誘導的活性增加，并通過減弱ox-LDL誘導的細胞損傷顯示出與ApoJ類似的結果。
　　結論:1.ApoJ可減少ox-LDL誘導的心肌細胞凋亡，減輕心肌細胞損傷;2.ox-LDL能利用氧化應激，通過ROS/oxCaMKⅡ通路引起