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文檔簡(jiǎn)介
1、目的：探討血管緊張素Ⅱ（AngⅡ)對(duì)大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK-52E)程序性壞死(necroptosis)的影響。
方法：體外合成RIP3siRNA干擾片段，用siRNA-mate轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染NRK-52E細(xì)胞，Western Blot驗(yàn)證RIP3蛋白表達(dá)。MTT法測(cè)細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞凋亡率,熒光酶標(biāo)儀測(cè)細(xì)胞中的活性氧(ROS)，實(shí)時(shí)定量PCR和Western Blot檢測(cè)RIP1、RIP3mRNA和蛋白的表達(dá)。<
2、br> 結(jié)果：RIP3siRNA轉(zhuǎn)染NRK-52E后，與對(duì)照組相比RIP3蛋白表達(dá)明顯下降(P<0.01)。與對(duì)照組比較，AngⅡ組存活率下降，凋亡率、ROS、RIP1、RIP3表達(dá)都明顯升高(P<0.01)。與AngII組比較，Z-VAD能增加細(xì)胞存活率，降低凋亡率(P<0.01)、ROS水平(P<0.01)，上調(diào)RIP1、RIP3表達(dá)(P<0.01)；Nec-1和RIP3siRNA能降低壞死率(P<0.01)，對(duì)凋亡率無(wú)明顯影響(
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