實驗性心肌缺血及藥物干預的蛋白質組學研究.pdf

1、缺血性心臟病(冠心病)是嚴重危害人類健康的主要疾病之一,其最基本的發(fā)病因素是由于冠狀動脈口徑變窄(原因有冠脈痙攣、冠脈粥樣硬化、瘀血塊堵塞等),導致心肌營養(yǎng)血流量降低.氧自由基、能量饋乏、鈣超載、酸中毒和免疫損傷等因素在心肌缺血損傷中發(fā)揮重要作用.垂體后葉素(pit)誘導的心肌缺血動物模型由于操作簡便、可靠性好,在抗心肌缺血藥物研究中得到廣泛應用.從所查文獻中未見有關該動物模型缺血心肌蛋白質組學研究的報道,而研究該動物模型缺血心肌蛋白質

2、組學變化規(guī)律,除可進一步闡明缺血心肌的損傷機制外,還有助于闡明抗心肌缺血藥物(如消心痛、四逆湯)的機理.本研究擬達到以下目的:1.研究垂體后葉素誘導NIH小鼠缺血心肌的蛋白質變化譜,為抗心肌缺血藥物研究建立基礎;2.闡明消心痛、四逆湯等藥物干預缺血心肌的蛋白質組學變化;3.從蛋白質組學角度闡明四逆湯配伍規(guī)律,為中藥復方配伍規(guī)律研究探素一條新思路.實驗方法:實驗分為正常對照組、缺血模型組、消心痛組、四逆湯組、附子組、附子+干姜組、附子+甘

3、草組、干姜+甘草組共8組.正常組和模型組每天灌服蒸餾水,其余各組灌服相應藥物,連續(xù)給藥5天后腹腔注射烏拉坦(2g/kg)麻醉,用BL-Century生物信號采集系統(tǒng)監(jiān)測小鼠心電圖,腹腔注射垂體后葉素(20u/kg),50min后快速取左心室肌組織,用預冷心肌清洗液沖洗去血漬,保存于液氮待測.提取心肌總蛋白質,采用Bradford法定量總蛋白質含量.利用二維等電聚焦電泳分離總蛋白質,考馬斯亮蘭染色,PDQuest7.1.1圖像分析軟件分析