不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對大鼠腎臟Bcl-2蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：過度訓(xùn)練可以引起機(jī)體包括腎臟在內(nèi)的多個(gè)臟器疲勞或損傷。如何防止運(yùn)動(dòng)疲勞及損傷是目前運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)界的研究重點(diǎn)。本研究通過游泳方法建立運(yùn)動(dòng)模型，觀察不同運(yùn)動(dòng)負(fù)荷狀態(tài)下大鼠腎臟的組織病理變化。應(yīng)用免疫組化法檢測Bcl-2蛋白在不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組的表達(dá)情況，應(yīng)用末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口標(biāo)記法(TUNEL)檢測大鼠腎臟組織細(xì)胞凋亡情況，并對細(xì)胞凋亡的機(jī)制進(jìn)行初步探討，以期為過度訓(xùn)練對腎臟的影響提供理論基礎(chǔ)。 方法：40只雄性Wistar

2、大鼠隨機(jī)分成3組，分別為對照組、一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組和超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組。(1)對照組：常規(guī)飼養(yǎng)，不運(yùn)動(dòng)；(2)一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組：進(jìn)行中等強(qiáng)度游泳訓(xùn)練，每周訓(xùn)練6天，每天訓(xùn)練1次。(3)超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組：與一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組運(yùn)動(dòng)環(huán)境相同，前2周的訓(xùn)練安排同一般負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組，第3周開始負(fù)重訓(xùn)練，尾部負(fù)重從1％．5％重量逐漸增加，訓(xùn)練時(shí)間不變。從第4周開始每天上、下午各訓(xùn)練1次，并保持這一運(yùn)動(dòng)量直到第8周。各運(yùn)動(dòng)組訓(xùn)練滿8周后，24小時(shí)后2％(40mg／kg)的戊

3、巴比妥腹腔麻醉，取腎組織，常規(guī)石蠟包埋，制作5um石蠟切片。采用HE染色觀察腎臟的組織病理變化，應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測腎組織中的Bcl-2蛋白的表達(dá)情況，用TUNEL法檢測大鼠腎臟組織細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：(1)一般情況觀察：對照組和一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組情況正常，超負(fù)荷組神態(tài)困倦，易受驚嚇，毛發(fā)脫落，體形消瘦、雙眼暗淡無光。 (2)組織病理觀察：對照組腎小管形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，間質(zhì)無充血、水腫。一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組腎小球輕度腫大、囊腔面

4、積減小。超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組腎小管排列稀疏、紊亂，腎小囊消失、腎小球變性。 (3)免疫組化結(jié)果：對照組和一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組，Bcl-2在腎臟細(xì)胞漿中有明顯表達(dá)，而在超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組大鼠腎小管細(xì)胞的胞漿中表達(dá)較少，統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果也顯示超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組Bcl-2表達(dá)較對照組顯著減少(p＜0.05)。 (4)細(xì)胞凋亡結(jié)果：對照組和一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組腎臟組織中凋亡表達(dá)較少，而在超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組大鼠腎臟細(xì)胞漿有大量表達(dá)，統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果顯示超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組凋亡較對照組顯著

5、增加(p＜0.05)。 (5)凋亡率與Bcl-2表達(dá)的相關(guān)關(guān)系：統(tǒng)計(jì)分析顯示，凋亡率與Bcl-2表達(dá)的相關(guān)系數(shù)r=-0.569。 結(jié)論：(1)一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷后，腎小球輕度腫脹，其他未見到明顯病理變化。超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后，腎臟出現(xiàn)嚴(yán)重病理性變化。腎小管排列紊亂，腎小囊消失、腎小球變性。提示：適宜負(fù)荷運(yùn)動(dòng)不會(huì)造成腎臟組織的損傷，而長時(shí)間超負(fù)荷訓(xùn)練會(huì)對腎臟造成損傷。 (2)正常大鼠腎組織Bcl-2蛋白有一定表達(dá)，一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組

6、與對照組相比Bcl-2蛋白表達(dá)有所升高，但沒有顯著性差異；超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組大鼠腎組織Bcl-2表達(dá)與一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組和對照組相比顯著降低。提示：適宜的運(yùn)動(dòng)會(huì)使Bcl-2蛋白表達(dá)上調(diào)，而長期的超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)會(huì)使Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)。 (3)正常大鼠腎組織細(xì)胞凋亡表達(dá)較少，隨著運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的增加，細(xì)胞凋亡率增加，超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組細(xì)胞凋亡表達(dá)與一般運(yùn)動(dòng)負(fù)荷組和對照組相比顯著性升高。提示：細(xì)胞凋亡與運(yùn)動(dòng)負(fù)荷有關(guān)，超負(fù)荷運(yùn)動(dòng)細(xì)胞凋亡的存在或許是運(yùn)動(dòng)疲勞產(chǎn)