利用cDNA-AFLP技術研究附加-丟失異源染色體小冰麥的基因表達差異.pdf

1、隨著世界人口的不斷增長，對糧食總量的需求也不斷增加。目前，主要通過雜種優(yōu)勢的利用來實現(xiàn)農(nóng)作物增產(chǎn)的目的。盡管雜種優(yōu)勢在生產(chǎn)應用中創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟效應，但人們對于雜種優(yōu)勢機理的認識仍然十分有限，這嚴重束縛了對雜種優(yōu)勢的進一步利用。分離雜種和親本之間的差異表達基因?qū)τ诮沂倦s種與親本的基因表達特征、闡明重要基因功能及理解雜種優(yōu)勢的機理具有重要意義。 本研究異附加系10-44，13-44和相對應的在后代中丟失異源染色體的10-42，13

2、-42小冰麥為材料，采用cDNA．AFLP技術對附加和丟失異源染色體的品系進行基因表達差異的研究，分離克隆了大量差異表達基因，并對部分序列進行了差異表達驗證和形成機理的初步研究。主要結果如下： 1．以小麥葉片為材料，采用cDNA-AFLP方法分析兩種樣本之間的序列表達特征，并分離它們之間的差異表達序列。256對引物組合共檢測出約600多個差異片段，差異表達既有質(zhì)上的差異也有量上的差異。回收了其中的269個差異片段進行測序并進行序

3、列比對，其中10號71個，13號198個。blast(EST)比對結果表明，這些序列大部分來自于小麥屬cDNA文庫，由于對小麥基因的功能研究的較少，所以多數(shù)序列沒有找到確切的功能。 2．對測序結果進行分析，從中挑選了79個差異片段設計特異引物進行RT-PCR和Rea1-Time PCR定量檢測，檢測結果表明29個序列表達量有差異，其中11個是有和無的差異，18個是表達量多少的差異。在11個表達量有和無差異的序列中，有一個是由于基