腫瘤增殖型腺病毒介導(dǎo)RNA干擾沉默Survivin基因治療大腸癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本課題設(shè)計(jì)了以下三部分的研究，旨在構(gòu)建特異性強(qiáng)，轉(zhuǎn)染率高，攜帶針對人Survivin的shRNA的腫瘤增殖型腺病毒載體，研究其介導(dǎo)的以人Survivin為靶標(biāo)的RNA干擾對結(jié)腸癌細(xì)胞株HT 29中Suuvivin mRNA和蛋白的表達(dá)、對結(jié)腸癌細(xì)胞HT 29增殖和凋亡的影響、時效性及其意義，探討腫瘤增殖型腺病毒介導(dǎo)RNA千擾對結(jié)腸癌的治療作用，為大腸癌的基因治療探索新的治療工具。 第一部分:腫瘤增殖型腺病毒質(zhì)粒載體pAd-del

2、E 1 b55kD的構(gòu)建及鑒定。 第二部分:攜帶針對人Survivin的shRNA的腫瘤增殖型腺病毒載體構(gòu)建與鑒定。 第三部分:應(yīng)用腫瘤增殖型腺病毒為載體的RNA千擾沉默Survivin基因。 本研究結(jié)果提示構(gòu)建成功攜帶針對人Survivin的shRNA的腫瘤增殖型腺病毒載體Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP，其能選擇性地高效轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29并有效干擾Survivin，且