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1、本課題設(shè)計(jì)了以下三部分的研究,旨在構(gòu)建特異性強(qiáng),轉(zhuǎn)染率高,攜帶針對(duì)人Survivin的shRNA的腫瘤增殖型腺病毒載體,研究其介導(dǎo)的以人Survivin為靶標(biāo)的RNA干擾對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞株HT 29中Suuvivin mRNA和蛋白的表達(dá)、對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞HT 29增殖和凋亡的影響、時(shí)效性及其意義,探討腫瘤增殖型腺病毒介導(dǎo)RNA千擾對(duì)結(jié)腸癌的治療作用,為大腸癌的基因治療探索新的治療工具。 第一部分:腫瘤增殖型腺病毒質(zhì)粒載體pAd-del
2、E 1 b55kD的構(gòu)建及鑒定。 第二部分:攜帶針對(duì)人Survivin的shRNA的腫瘤增殖型腺病毒載體構(gòu)建與鑒定。 第三部分:應(yīng)用腫瘤增殖型腺病毒為載體的RNA千擾沉默Survivin基因。 本研究結(jié)果提示構(gòu)建成功攜帶針對(duì)人Survivin的shRNA的腫瘤增殖型腺病毒載體Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP,其能選擇性地高效轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29并有效干擾Survivin,且
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