聲動力學療法對S180腹水瘤細胞幾種核內蛋白表達及酶活性影響的研究.pdf

1、本實驗基于聲動力學療法對腫瘤細胞的增殖活性存在兩種抑制作用模式(直接殺傷和誘導凋亡)的研究基礎之上，采用頻率為1.34MHz，強度為3W/cm2高頻聚焦超聲激活血卟啉處理S180腹水型腫瘤細胞，在處理后的不同時間段取材，并通過免疫細胞化學等方法檢測在超聲激活血卟啉的殺傷和誘導凋亡的協同作用下，與腫瘤細胞增殖活性、凋亡調節(jié)、基因復制能力、轉錄活性、蛋白質合成等密切相關的幾種核內蛋白質和關鍵酶的表達隨取材時間的動態(tài)變化，利用專業(yè)圖像分析軟件

2、和統計學軟件對它們表達的變化進行分析處理，得到差異顯著性分析結果并給予生物學意義上的合理解釋。不同的檢測指標的變化也間接的反映了聲動力學療法對腫瘤細胞核內基因表達活動的影響?？傊?，本實驗研究進一步為聲動學療法抑癌機制的闡明，積累科學的數據和有益的資料。通過實驗得到如下結果： 1.分子生物學研究表明，核仁組成區(qū)嗜銀蛋白是與具有轉錄活性rRNA基因相結合的一類高度磷酸化的酸性非組蛋白，該蛋白表達量的強弱和形態(tài)學的變化可以間接反映細胞

3、內rDNA轉錄活性的水平、以及核仁組成區(qū)結構和功能的變化。實驗結果表明：SDT療法對嗜銀蛋白表達有明顯的抑制作用，使腫瘤細胞的增殖活性受到顯著的抑制。 2.增殖細胞核抗原(PCNA)是DNA聚合酶δ的輔助蛋白，是真核生物細胞DNA合成所必需的核蛋白，其合成和表達與細胞的增殖狀態(tài)有關。此外，該蛋白還在DNA修復過程中起到重要的作用。實驗結果表明，SDT療法對腫瘤細胞的增殖細胞核抗原表達的具有顯著抑制作用，可直接影響到腫瘤細胞核內D

4、NA的合成、復制、修復過程，從而進一步抑制了腫瘤細胞的增殖活性。 3.突變型p53蛋白不僅喪失了野生型p53蛋白對細胞增殖、細胞周期進程的負調控能力以及抑制細胞惡性轉化、促進細胞凋亡的作用，而且還干擾了野生型p53亞基的正常功能，并獲得細胞轉化能力，具有癌蛋白的生物功能。實驗結果表明，SDT療法對S180腹水型腫瘤細胞中突變型p53蛋白的表達有明顯的抑制作用，進而使其促癌功能的發(fā)揮受到了抑制。 4.在多種人類細胞中都發(fā)現

5、有c-myc的高度表達，它能促進細胞增殖，抑制細胞分化。近年研究表明，c-myc還參與細胞凋亡的調控.c-myc是調控細胞的周期的主要基因，能調節(jié)細胞增殖和死亡兩個截然相反的過程。信號傳遞系統激活后，如果培養(yǎng)體系中有足夠的生長因子持續(xù)作用，則細胞增殖并分裂；否則便通過細胞凋亡機制誘導細胞發(fā)生死亡。實驗結果表明：SDT療法可使S180腹水型腫瘤細胞中c-myc蛋白的表達受到抑制，其表達量的變化可能會進一步誘導腫瘤細胞發(fā)生凋亡。 5

6、.c-jun和c-fos是一類與腫瘤細胞多種癌基因轉錄活動密切相關的核轉錄因子，c-fos、c-jun在多數腫瘤細胞中高度表達，二者通過亮氨酸拉鏈結構結合形成同源或異源二聚體，構成轉錄調控蛋白AP-1，作用于靶基因調控序列中的AP-1結合位點，調節(jié)靶基因的表達，對細胞的增殖和分化起重要的調控作用。研究結果表明：SDT療法對二者的表達有明顯的抑制作用，表達量的下降可導致其對相關癌基因的轉錄活動的調節(jié)作用受到嚴重影響，從而影響到癌細胞旺盛的

7、增殖活動。 6.端粒作為細胞生長有絲分裂的時鐘，在細胞生長、衰老、凋亡中起著重要的作用，而端粒酶是一種反轉錄酶對于維持和平衡細胞中端粒的長度，修復斷裂的染色體末端，起著非常重要的作用。多數腫瘤細胞中端粒酶活性較高，因此腫瘤細胞獲得了較強的增殖能力。實驗結果表明：SDT療法使端粒酶活性受到顯著抑制，使受損的癌細胞的染色體無法進行有效的修復，加快了其死亡的進程。 7.DNA拓撲異構酶Ⅱ是一類具有調節(jié)DNA三維結構的核酶，它直