2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)霍夫包爾細(xì)胞個(gè)數(shù)和TLR4蛋白在正常及重度子癇前期患者晚孕胎盤上的表達(dá)進(jìn)行分析,并用雙重免疫熒光技術(shù)及激光共聚焦顯微鏡觀察兩組胎盤TLR4和TNF-α之間,霍夫包爾細(xì)胞與TNF-α僅的相互關(guān)系,試圖探討霍夫包爾細(xì)胞和TLR4在重度子癇前期發(fā)病機(jī)制中作用. 方法 選擇正常及重度子癇前期患者各30例,在剖宮產(chǎn)胎盤娩出5min內(nèi),取臍帶附著處母體面胎盤組織(避開(kāi)鈣化、壞死部位)約1cm×1cm×1c

2、m大小的組織,立即OCT包埋,冰凍切片機(jī)制作8μm厚的連續(xù)切片,隨機(jī)選擇結(jié)構(gòu)完整的8張切片,立即用4℃丙酮固定10min后染色.1.采用SP免疫組化試劑盒對(duì)兩組胎盤組織上的霍夫包爾細(xì)胞上的CD68(一抗是鼠抗人CD68單克隆抗體),Toll樣受體4(一抗是鼠抗人TLR4單克隆抗體)進(jìn)行染色.由于冰凍切片有可能破壞原來(lái)的組織結(jié)構(gòu),為更好的區(qū)分滋養(yǎng)細(xì)胞和霍夫包爾細(xì)胞,每批片子以cytokeratin(CK,細(xì)胞角蛋白)標(biāo)記滋養(yǎng)細(xì)胞作為對(duì)照.

3、每張切片隨機(jī)選取不重疊的10個(gè)高倍視野(40×10倍),計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞,以平均每100個(gè)細(xì)胞中含陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)作為陽(yáng)性細(xì)胞率.2.用雙重免疫熒光技術(shù)及激光共聚焦顯微鏡觀察兩組胎盤TLR4和TNF-α之間,CD68與TNF-α之間的相互關(guān)系.每張切片隨機(jī)選取不重疊的10個(gè)高倍視野(40×10倍),計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞.以有CD68、TNF-α共表達(dá)的細(xì)胞數(shù)占CD68陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的比例作為CD68、TNF-α的共表達(dá)率.以有TLR4、TNF-α共表達(dá)的細(xì)

4、胞數(shù)占TLR4陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的比例作為TLR4、TNF-α的共表達(dá)率. 結(jié)果 1. 重度子癇前期患者和正常對(duì)照組年齡和孕周比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05). 2. CD68抗原表達(dá)于兩組胎盤絨毛間質(zhì)細(xì)胞的胞漿.重度子癇前期胎盤組織中霍夫包爾細(xì)胞平均數(shù)目(20.5±3.1)高于正常對(duì)照組(7.1±2.7),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05). 3.TLR4 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)主要定位于胎盤絨毛間質(zhì)細(xì)胞,包括霍夫包爾細(xì)胞質(zhì)或(和)細(xì)

5、胞膜,呈棕黃(褐)色.在正常胎盤組織中TLR4蛋白陽(yáng)性率為11.8﹪,重度子癇前期胎盤組織中陽(yáng)性率為30.4﹪.差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05). 4.重度子癇前期組CD68陽(yáng)性細(xì)胞中82.6﹪同時(shí)也有TNF-α表達(dá),正常對(duì)照組87.8﹪同時(shí)有TNF-α表達(dá).即在兩組中CD68陽(yáng)性的細(xì)胞通常TNF-α也陽(yáng)性,而兩組共表達(dá)率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05). 5.重度子癇前期組TLR4陽(yáng)性細(xì)胞88.4﹪有TNF-α表達(dá),正常組TLR4陽(yáng)性細(xì)胞

6、80.8﹪同時(shí)有TNF-α表達(dá).即TLR4與TNF-α在兩組中均有較高的共表達(dá)率,而兩組共表達(dá)率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05). 結(jié)論 1.本研究證實(shí)霍夫包爾細(xì)胞存在于胎盤絨毛間質(zhì).重度子癇前期晚孕胎盤中的霍夫包爾細(xì)胞數(shù)量顯著高于正常對(duì)照組,提示在重度子癇前期晚孕胎盤上霍夫包爾活化增多. 2.本研究顯示,在重度子癇前期組霍夫包爾細(xì)胞增多,CD68陽(yáng)性細(xì)胞中82.6﹪同時(shí)也有TNF-α表達(dá).推測(cè)霍夫包爾細(xì)胞有絲分裂活動(dòng)增強(qiáng),細(xì)胞數(shù)目增加,分

7、泌過(guò)量的活性細(xì)胞因子如TNF-α,加劇胎盤局部的免疫失衡,參與重度子癇前期的發(fā)生,發(fā)展. 3.本研究顯示TLR4主要表達(dá)在胎盤絨毛間質(zhì)細(xì)胞,包括霍夫包爾細(xì)胞細(xì)胞膜或(和)細(xì)胞漿.重度子癇前期晚孕胎盤中的TLR4表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組,而且88.4﹪同時(shí)TNF-α陽(yáng)性.提示在子癇前期中TLR4過(guò)度激活,啟動(dòng)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),表達(dá)過(guò)量的TNF-α,參與子癇前期的發(fā)生與發(fā)展. 4.本研究顯示TLR4在霍夫包爾細(xì)胞上有表達(dá),而且在重度子癇前期胎盤中

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