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文檔簡介
1、子癇前期是妊娠期特有疾病,屬于妊娠期高血壓疾病的五種狀況之一,其主要的臨床表現(xiàn)是孕婦在妊娠20周后出現(xiàn)的高血壓,蛋白尿,同時可能出現(xiàn)全身各臟器功能異常。臨床上根據(jù)病情輕重將子癇前期分為輕度子癇前期和重度子癇前期,而重度子癇前期又因發(fā)病孕周不同分為早發(fā)型重度子癇前期和晚發(fā)型重度子癇前期。子癇前期的發(fā)病率較高,在我國約為9.4%,且重度子癇前期有許多嚴(yán)重的并發(fā)癥,嚴(yán)重危害母嬰健康,是造成孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒死亡的主要原因之一。子癇前期患者的基本病
2、理改變?yōu)槿硇⊙墀d攣,可以使腦、心、肝、腎等重要臟器血供受限,造成孕婦全身臟器功能損害,同時胎盤部位血管痙攣使血流灌注減少,胎盤缺血缺氧,最終可能導(dǎo)致胎盤早剝,胎兒宮內(nèi)生長發(fā)育受限,甚至胎兒死亡。由于子癇前期發(fā)病率高、并發(fā)癥嚴(yán)重,國內(nèi)外許多學(xué)者對其發(fā)病機制進行了大量研究,雖然現(xiàn)在并未完全闡明,但已形成的發(fā)病機制較多,其中包括有滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲異常、免疫調(diào)節(jié)功能異常、內(nèi)皮細(xì)胞損傷、遺傳因素和營養(yǎng)因素等。由于子癇前期的癥狀在胎盤娩出后可以很快
3、自愈或緩解,因此有學(xué)者認(rèn)為胎盤形成異常與子癇前期發(fā)生有一定聯(lián)系。胎盤主要是由滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育形成的,滋養(yǎng)細(xì)胞具有高度分化、增殖及浸潤等特性,與腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤的特性十分類似。許多研究表明滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲異常會影響胎盤血管形成,造成胎盤淺著床,可能最終導(dǎo)致病理妊娠如子癇前期。
Notch信號通路是進化上十分保守的蛋白通路,對于細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等都有一定影響。經(jīng)典Notch信號通路的激活是通過相鄰細(xì)胞的配體與受體相互作用,通路激活
4、后Notch受體經(jīng)過三次剪切,胞內(nèi)段(NICD)被活化釋放,并進入細(xì)胞核與轉(zhuǎn)錄因子CSL結(jié)合,形成NICD/CSL轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合體,從而激活 HES、HEY、HERP等轉(zhuǎn)錄抑制因子家族的靶基因,最終抑制或活化目的基因的轉(zhuǎn)錄。已有大量研究發(fā)現(xiàn) Notch信號通路在多數(shù)腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài),并且可以促進腫瘤細(xì)胞的增殖及腫瘤血管的形成。Notch信號通路有許多受體及配體,Notch1是Notch信號通路的主要受體之一,Jagged1是主要配
5、體之一。已有研究發(fā)現(xiàn)Notch信號通路影響滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲,Notch家族蛋白在妊娠的各個階段的胎盤組織中均有表達(dá);有研究用免疫組化法檢測到正常胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞或血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)Notch1蛋白、Jagged1蛋白。這些研究結(jié)果顯示Notch信號通路可能參與了胎盤的形成過程,然而Notch信號通路是否在子癇前期發(fā)病機制中起一定作用現(xiàn)鮮有報導(dǎo)。本研究主要是通過比較 Notch1、Jagged1mRNA和蛋白在正常妊娠孕婦胎盤組織與重度子癇前
6、期患者胎盤組織中的表達(dá)情況,初步探討Notch信號通路與重度子癇前期的關(guān)系。
目的:本研究主要是探究Notch1、Jagged1mRNA和蛋白在正常妊娠孕婦胎盤組織和重度子癇前期患者胎盤組織中的表達(dá)情況,初步探討 Notch信號通路尤其是Notch1、Jagged1與重度子癇前期的關(guān)系。
材料和方法:
1.研究對象
選取2013年12月至2014年12月就診于鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院的重度子癇前期患者
7、胎盤組織共60例,其中包括早發(fā)型重度子癇前期患者胎盤組織30例,晚發(fā)型重度子癇前期患者胎盤組織30例。重度子癇前期診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)按第八版婦產(chǎn)科教材。同時選取正常足月產(chǎn)孕婦胎盤組織30例作為正常足月組,因?qū)m頸機能不全或社會因素行中孕引產(chǎn)者的胎盤組織30例作為早產(chǎn)組。以上各組研究對象妊娠前后除了重度子癇前期外均無其他內(nèi)科、外科合并癥,本次妊娠均為單胎妊娠。本實驗經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn),標(biāo)本提供者均知情同意。
2.方法
在胎
8、盤娩出的15分鐘內(nèi)收取胎盤標(biāo)本,整個操作過程嚴(yán)格遵照無菌原則,取材過程中避開胎盤鈣化區(qū)、壞死處。將剪取的組織塊放在消毒過的濾紙上吸取血液,處理完畢后將胎盤組織分成2份,1份剪成若干條狀裝入凍存管中并標(biāo)號,凍存管可以放入液氮中暫時儲存,最終放入-80℃冰箱保存。另外1份放入培養(yǎng)皿中,用生理鹽水反復(fù)沖洗干凈后用10%中性福爾馬林固定,最終用于免疫組化實驗。用免疫組化方法檢測Notch1、Jagged1蛋白在胎盤組織中的定位及相對表達(dá)量。另外
9、應(yīng)用實時熒光定量(RT-PCR)方法檢測各組胎盤組織中Notch1mRNA、Jagged1mRNA表達(dá)量。
3.統(tǒng)計學(xué)處理
采用SPSS19.0軟件對本實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。其中計量資料用-x±s表示,兩組間比較符合正態(tài)分布、方差齊性,采用兩獨立樣本的t檢驗;等級資料的比較采用非參數(shù)秩和檢驗。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。
結(jié)果:
1.各組孕產(chǎn)婦一般臨床數(shù)據(jù)的比較
晚發(fā)型重度子癇前期組、正
10、常足月組、早發(fā)型重度子癇前期組及早產(chǎn)組的產(chǎn)婦平均年齡分別為29±4歲、26±3歲、28±4歲、27±3歲;生產(chǎn)時平均孕周分別為38.1±1.1周、39.3±0.7周、27.3±0.6周、28.5±1.9周;收縮壓分別為150.89±7.86mmHg、117.50±5.32mmHg、157.45±5.98mmHg、113.34±6.37mmHg;舒張壓分別為93.54±4.56mmHg、75.43±4.67mmHg、107.67±5.73
11、mmHg、78.13±3.58mmHg。四組間產(chǎn)婦年齡相比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義;正常足月組產(chǎn)婦生產(chǎn)時孕周大于晚發(fā)型重度子癇前期組,差異無統(tǒng)計學(xué)意義;早產(chǎn)組產(chǎn)婦生產(chǎn)時孕周大于早發(fā)型重度子癇前期組,差異無統(tǒng)計學(xué)意義;晚發(fā)型重度子癇前期組收縮壓和舒張壓均高于正常足月組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;早發(fā)型重度子癇前期組收縮壓和舒張壓均高于早產(chǎn)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.各組胎盤組織中Notch1mRNA表達(dá)水平
晚發(fā)型重度子癇前期組
12、Notch1mRNA表達(dá)量是0.9021±0.1903,正常足月組Notch1mRNA表達(dá)量是1.0314±0.1536,晚發(fā)型重度子癇前期組Notch1mRNA表達(dá)量低于正常足月組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;早發(fā)型重度子癇前期組Notch1mRNA表達(dá)量是0.6832±0.1345,早產(chǎn)組 Notch1mRNA表達(dá)量是1.1076±0.1432,早發(fā)型重度子癇前期組Notch1mRNA表達(dá)量低于早產(chǎn)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3.各組胎
13、盤組織中Jagged1mRNA表達(dá)水平
晚發(fā)型重度子癇前期組Jagged1mRNA表達(dá)量是0.7895±0.1493,正常足月組 Jagged1mRNA表達(dá)量是1.1257±0.1378,晚發(fā)型重度子癇前期組Jagged1mRNA表達(dá)量低于正常足月組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;早發(fā)型重度子癇前期組Jagged1mRNA表達(dá)量是0.6779±0.1165,早產(chǎn)組Jagged1mRNA表達(dá)量是1.1065±0.1376,早發(fā)型重度子癇前期
14、組 Jagged1mRNA表達(dá)量低于早產(chǎn)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
4.各組胎盤組織中Notch1蛋白定位和表達(dá)強度
各組胎盤組織均可檢測到Notch1蛋白的表達(dá),Notch1蛋白主要連續(xù)表達(dá)于絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞及血管內(nèi)皮。Notch1蛋白在晚發(fā)型重度子癇前期組表達(dá)強度低于正常足月組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在早發(fā)型重度子癇前期組表達(dá)強度低于早產(chǎn)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
5.各組胎盤組織中Jagged1蛋白定位和表達(dá)強度<
15、br> 各組胎盤組織均可檢測到Jagged1蛋白的表達(dá),Jagged1蛋白主要連續(xù)表達(dá)于絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞。Jagged1蛋白在晚發(fā)型重度子癇前期組表達(dá)強度低于正常足月組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在早發(fā)型重度子癇前期組表達(dá)強度低于早產(chǎn)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)論:Notch1、Jagged1mRNA及其蛋白在重度子癇前期患者胎盤組織中呈現(xiàn)低表達(dá),提示Notch信號通路尤其是Notch1、Jagged1可能參與重度子癇前期
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