長(zhǎng)鏈非編碼RNA FEZF1--AS1在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的功能及相關(guān)機(jī)制初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級(jí)碩士學(xué)位論文長(zhǎng)鏈非編碼RNAFEZF1AS1在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的功能及相關(guān)機(jī)制初步研究TheroleandmechanismoflongnoncodingRNAFEZFlASlinthemetastasisofcolorectalcarcinoma課題來源：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(NO81272763)學(xué)位申請(qǐng)導(dǎo)師姓專業(yè)名培養(yǎng)類所在學(xué)人陳娜名周軍副教授稱病理學(xué)與病理生理學(xué)型學(xué)術(shù)型院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)

2、委員丁彥青教授張雅潔教授鐘雪云教授薛玲教授李學(xué)農(nóng)教授論文評(píng)閱人李智教授王爽副教授2014年5月20日廣州摘要提示其表達(dá)失調(diào)可能與結(jié)直腸癌發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān)，但其具體機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探討FEZFl一ASl在結(jié)直腸癌增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用及可能機(jī)制。方法1、采用ArraystarLncRNA芯片分析不同轉(zhuǎn)移潛能結(jié)直腸癌細(xì)胞株間lncRNA差異表達(dá)譜，通過Real—timePCR檢測(cè)結(jié)直腸癌細(xì)胞株及小樣本配對(duì)結(jié)直腸癌組織中差異表達(dá)lnc

3、RNAs的表達(dá)情況，篩選確定結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)長(zhǎng)鏈非編碼RNAFEZFlASl；應(yīng)用RealtimePCR檢測(cè)不同結(jié)直腸癌細(xì)胞株及大樣本配對(duì)結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)：采用原位雜交方法檢測(cè)FEZFlASl在具有隨訪資料臨床結(jié)直腸癌石蠟組織中的表達(dá)，通過SPSSl30軟件分析其表達(dá)水平與臨床病理因素之間的聯(lián)系及預(yù)后意義。2、采用慢病毒感染方法構(gòu)建穩(wěn)定干擾FEZFlASl的細(xì)胞株(HCTll6一Ai，Ci／M5Ai，Ci)和對(duì)照細(xì)胞株(HCTll6

4、NC／M5NC)。3、采用CCK8、平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力并分析細(xì)胞周期；遷移實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲遷移能力；裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)、腫瘤細(xì)胞裸鼠尾靜脈注射肺轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)直腸癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤能力及轉(zhuǎn)移能力。4、采用免疫組化方法檢測(cè)大樣本臨床結(jié)直腸癌石蠟組織中FEZFl蛋白的表達(dá)，用RealtimePCR方法檢測(cè)FEZFl在配對(duì)結(jié)直腸癌組織(標(biāo)本同檢測(cè)FEZFlASl一致)及相關(guān)結(jié)直腸癌細(xì)胞株中的表達(dá)情況，同時(shí)采用