產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌的分離、篩選、鑒定及其對(duì)肉雞飼養(yǎng)效果的影響.pdf

1、本研究分別從河南省不同地區(qū)采集的40余份樣品，首先通過80℃水浴加熱處理30 min，再在加有植酸鈣為底物的選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行產(chǎn)植酸酶芽孢桿菌的分離，篩選顯微鏡檢能產(chǎn)生芽孢的菌株，利用平板滴定法進(jìn)行高酶活菌株的篩選，然后對(duì)分離的菌株進(jìn)行耐熱、耐酸試驗(yàn)篩選耐受環(huán)境的高性能菌株，并采用釩鉬酸銨法測(cè)定篩選菌株的植酸酶活性。對(duì)上述篩選的菌株進(jìn)行生理生化鑒定和16S rDNA分子鑒定確定其種屬。
　　將篩選的高產(chǎn)植酸酶酶活的芽孢桿菌按照一定

2、的工藝制成粉劑，首先進(jìn)行小白鼠攻毒試驗(yàn)證明其安全性后，再通過飼喂肉雞研究其飼養(yǎng)效果。試驗(yàn)選用240只1日齡艾維茵肉雞，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞?？瞻讓?duì)照組使用基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加芽孢桿菌的濃度分別為107 CFU/g飼料、108 CFU/g飼料、109 CFU/g飼料。試驗(yàn)期42天。通過測(cè)定生長性能、新城疫抗體水平、免疫器官指數(shù)、腸道主要菌群結(jié)構(gòu)和磷代謝利用率等指標(biāo)，為研究其作為微生態(tài)飼料添加劑菌種奠

3、定了理論基礎(chǔ)。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明：從不同樣品中共分離出10株具有植酸酶酶活的菌株，通過顯微形態(tài)的觀察，該10株菌均為產(chǎn)芽孢的菌株。耐熱和耐酸試驗(yàn)篩選出了3株具有較強(qiáng)耐受性的菌株 B.Phy2、B.PHy3和 B.PHy9，且酶活分別為152 U/mL、172 U/mL和201 U/mL。顯微觀察表明該三株菌均為桿狀，都形成芽孢，生理生化鑒定初步確定該三株菌為芽孢桿菌屬的菌株，16s rDNA分子鑒定 B.Phy2、B.PHy3和

4、B.PHy9分別為球形芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、芽孢桿菌未定種。攻毒試驗(yàn)均表明這三株菌對(duì)小白鼠無致病作用。
　　動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明：在1～21日齡，試驗(yàn)組平均日增重均極顯著提高（P<0.01），其中低劑量Ⅰ組和中劑量Ⅱ組增重效果最明顯；料肉比方面，中劑量Ⅱ組增重效果最佳（P<0.05），低劑量I組、高劑量Ⅲ組與對(duì)照組相比均無明顯差異（P>0.05）。22～42日齡，低劑量Ⅰ組和中劑量Ⅱ組的平均日增重與對(duì)照組相比，有上升的趨勢(shì)，但均無顯

5、著差異（P>0.05）；料肉比方面，中劑量Ⅱ組的料肉比最低，與空白對(duì)照相比低了2.30％，差異顯著（P<0.05）。在1～42日齡，平均日增重方面，低劑量Ⅰ組和中劑量Ⅱ組與空白對(duì)照相比顯著提高（P<0.05），中劑量Ⅱ組的料肉比與空白對(duì)照組相較差異顯著（P<0.05）。各試驗(yàn)組間的胸腺指標(biāo)、法氏囊指標(biāo)和脾臟指標(biāo)均無顯著差異（P>0.05），但試驗(yàn)組與對(duì)照組相比均有提高趨勢(shì)。新城疫效價(jià)也沒有明顯提高（P>0.05）。21日齡時(shí)，中劑量Ⅱ組