雞源優(yōu)良枯草芽孢桿菌的分離、篩選及其對(duì)肉雞部分生理生化、免疫學(xué)指標(biāo)影響的研究.pdf

1、微生態(tài)制劑已在畜牧業(yè)養(yǎng)殖領(lǐng)域廣泛使用,目前作為制劑菌種的種類有很多,如乳酸菌類、酵母菌類、腸球菌類等。由于枯草芽孢桿菌具有耐高溫、膽堿、酸、酶等諸多特性而備受親睞。因此本研究從雞糞便中分離鑒定枯草芽孢桿菌,通過對(duì)分離株開展了一系列生物學(xué)特性的研究,篩選出優(yōu)良菌株用于肉雞生產(chǎn),評(píng)價(jià)其作為微生態(tài)制劑菌種的潛能。具體內(nèi)容如下:
　　1、采用細(xì)菌的傾注培養(yǎng)法和常規(guī)細(xì)菌分離鑒定方法并結(jié)合基于16S rRNA PCR擴(kuò)增及序列分析的方法,從3

2、7份雞糞便樣品中初步分離出17株疑似菌株,其中有13株被確定為枯草芽孢桿菌,命名為J1-J13。
　　2、對(duì)13株分離株進(jìn)行耐酸、耐膽堿、耐高溫、耐藥性的生物學(xué)特性研究。結(jié)果顯示:13株菌株經(jīng)過80℃、100℃和120℃處理后菌株的存活率分別為80％、70%和50%。J1、J5、J6、J8、J105株菌株在PH1.5時(shí)作用6 h后活菌數(shù)平均在3.21×106 CFU/g左右;J5、J7、J9、J10、J12、J136株菌株在膽堿濃

3、度為4 g/kg時(shí)作用4 h后活菌數(shù)平均在4.96×106 CFU/g左右;在藥物敏感試驗(yàn)中,所有菌株對(duì)大部分的抗生素都不敏感。綜合上述結(jié)果篩選出5株性狀優(yōu)良的枯草芽孢桿菌。
　　3、開展2株分離菌對(duì)大腸桿菌、沙門氏桿菌體外抑菌試驗(yàn),結(jié)果表明:先接種分離菌再接種致病菌,J5、J10抑菌作用明顯且在24 h時(shí)抑菌作用最強(qiáng);同時(shí)接種分離菌和致病菌抑菌作用較弱,其中J5、J10作用相對(duì)良好;先接種致病菌再接種分離菌的抑菌作用最弱,J5抑

4、菌作用效果相對(duì)較好。綜合抑菌試驗(yàn)結(jié)果選擇J5和J10作為后續(xù)的試驗(yàn)菌種。
　　4、將分離株J5與J10菌株按活菌數(shù)為1.0×109 CFU/ml添加在飼料中飼喂肉雞。定期采集直腸糞便和血液檢測(cè)試驗(yàn)肉雞菌群數(shù)量、部分生理生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的變化,結(jié)果如下:
　　(1)腸道菌群檢測(cè)結(jié)果:15、45和60日齡試驗(yàn)組總需氧菌數(shù)量低于對(duì)照組,兩者相比差異顯著(P<0.05);15日齡試驗(yàn)組總厭氧菌數(shù)量高于對(duì)照組,兩者相比差異顯著(P<

5、0.05);整個(gè)試驗(yàn)期試驗(yàn)組乳酸桿菌的數(shù)量均高于對(duì)照組,兩者相比差異顯著(P<0.05)。15和30日齡試驗(yàn)組大腸桿菌的數(shù)量低于對(duì)照組,而雙歧桿菌的數(shù)量高于對(duì)照組,兩者相比差異顯著(P<0.05)。
　　(2)免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果:60日齡試驗(yàn)組免疫球蛋白IgA和IgG的含量高于對(duì)照組,兩者相比差異顯著(P<0.05);整個(gè)試驗(yàn)期試驗(yàn)組IgM、CD4+、CD8+的含量略高于對(duì)照組,但兩者相比差異不顯著(P>0.05)。
　　(3