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1、目的:對(duì)不同胡蘆巴提取物中胡蘆巴堿、薯蕷皂苷元進(jìn)行含量測(cè)定,建立高效液相法測(cè)定胡蘆巴提取物中薯蕷皂苷元含量的方法;研究不同胡蘆巴提取物對(duì)DPPH及羥基自由基(·OH)的清除效果;觀察胡蘆巴乙醇提取物對(duì)大鼠酒精性脂肪肝(AFL)的治療作用,并初步探討其作用機(jī)制。
方法:采用藥典方法測(cè)定各提取物中的胡蘆巴堿;薯蕷皂苷元的含量測(cè)定:色譜柱為大連伊力特Hypersil ODS-1(4.6×250mm,5μm),流動(dòng)相為甲醇:水(86:
2、14,v/v),流速1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)203nm,柱溫35℃;紫外法測(cè)定體外抗氧化作用;采用高脂飼料喂養(yǎng)和酒精灌胃結(jié)合的方法建立SD大鼠AFL模型,病理檢查結(jié)果顯示造模成功后,用生理鹽水做空白對(duì)照,水飛薊賓膠囊和胡蘆巴總皂苷(TFGs)做陽性對(duì)照,給予胡蘆巴乙醇提取物。給藥四周后處死大鼠,制備血清、肝勻漿,取肝組織做病理檢查。測(cè)定并比較各組間血清甘油三醋(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LD
3、L-C)、總膽紅素(TBili);比較各組間天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ATL);比較各組間肝臟脂質(zhì)含量;酶聯(lián)免疫(ELISA)法測(cè)定并比較各組間超氧化物歧化酶(SOD)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、脂聯(lián)素(adiponectin)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平;計(jì)算并比較各組肝指數(shù)。
結(jié)果:薯蕷皂苷元的色譜峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系,線性范圍為43.2μg/ml~864μg/ml(r=0.9
4、995),平均回收率(n=9)為100.3%;胡蘆巴各提取物對(duì)DPPH和羥基自由基(·OH)有明顯的清除效果;胡蘆巴乙醇提取物能顯著改善AFL大鼠肝細(xì)胞脂肪變性,顯著降低AFL大鼠血清TG、TC、LDL-C(P<0.01)水平,胡蘆巴乙醇提取物能顯著降低AFL大鼠AST(中劑量P<0.01)、ALT(小劑量P<0.05,中、大劑量P<0.01)水平,胡蘆巴乙醇提取物能顯著降低AFL大鼠肝臟中TC、TG含量(P<0.01),胡蘆巴乙醇提取
5、物能降低肝指數(shù)(P<0.05),TFGe能顯著降低AFL大鼠血清TNF-α水平(P<0.01),升高血清adiponcetin(P<0.01)、SOD(大劑量組P<0.01)、AMPK水平(大劑量組P<0.01)。
結(jié)論:采用HPLC法測(cè)定胡蘆巴提取物中薯蕷皂苷元的含量,該方法準(zhǔn)確可靠、重現(xiàn)性好,可用于含量測(cè)定;胡蘆巴各提取物具有清除DPPH和羥基自由基的作用;胡蘆巴乙醇提取物能明顯改善AFL大鼠肝臟腫大狀況,改善肝組織脂肪變
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