NF-κB、氧化應(yīng)激在酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中的作用及水飛薊素干預(yù)研究.pdf

1、背景：乙醇引起的脂肪肝的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全明確,其中氧化應(yīng)激和細(xì)胞因子的作用在酒精性脂肪肝的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用。核轉(zhuǎn)錄因子κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB)是可被多種炎性因子激活的一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,可以被多種細(xì)胞因子或外界刺激激活,調(diào)節(jié)下游多種基因的轉(zhuǎn)錄,參與炎癥反應(yīng)過程。近年來NF-κB在肝臟疾病中的功能和調(diào)控受到關(guān)注,酒精性脂肪肝的形成涉及到NF-κB的活化。水飛薊素具有強(qiáng)力抗氧化作用,是一種

2、安全、穩(wěn)定、有效的保肝藥物,但其具體作用機(jī)制尚未完全明確。因此,本實(shí)驗(yàn)在建立酒精性脂肪肝動物模型的基礎(chǔ)上,探討 NF-κB、氧化應(yīng)激在酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制中的作用及水飛薊素對酒精性脂肪肝的保護(hù)作用是否與抑制NF-κB的表達(dá)、氧化應(yīng)激有關(guān)。
　　目的：建立酒精性脂肪肝大鼠模型,探討NF-κB、氧化應(yīng)激在酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中的作用及水飛薊素對酒精性脂肪肝的保護(hù)作用是否與抑制NF-κB的表達(dá)、氧化應(yīng)激有關(guān)。
　　方法：用酒精給

3、大鼠灌胃,結(jié)合高脂飲食,在6周時間內(nèi)制造酒精性脂肪肝模型。所有大鼠隨機(jī)分為5組:正常對照組(10只)、模型組(15只)、水飛薊素低、中、高劑量組(每組各15只)。除正常對照組以等體積生理鹽水灌胃外,其余各組均以乙醇灌胃,每天兩次,第一周為6 g/kg/d,以后每周逐步增加劑量直至8 g/kg/d,共6周。對于水飛薊素組,在每天第一次酒精灌胃2小時后,分別給予水飛薊素100mg/kg/d、150mg/kg/d、200mg/kg/d灌胃。在

4、實(shí)驗(yàn)過程中,觀察大鼠的一般情況。6周實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,所有動物予以麻醉,腹主動脈取血。HE染色觀察肝臟病理改變,全自動生化分析儀檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性、總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)水平。生化法測定肝勻漿超氧化物歧化酶(superoxide d

5、ismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及肝組織TG水平。免疫組化法測定肝組織中核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB)、細(xì)胞間黏附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白介素-6(interleuki

6、n-1β,IL-6)表達(dá)。
　　結(jié)果：6周末,酒精引起了明顯的肝臟脂肪變性。與正常對照組比較,模型組肝組織可見大量脂肪滴的累積,有不同程度的脂肪變性以及小葉間炎癥;模型組血清ALT、AST活性明顯升高(分別是P<0.01, P<0.05),TG、TBIL水平明顯升高(分別是P<0.01,P<0.05);模型組肝組織勻漿中SOD、GPx活性顯著降低(P<0.01)而MDA含量顯著升高(P<0.01);模型組肝組織中TG水平明顯上升(

7、P<0.01);模型組肝組織中NF-κB P65、ICAM-1、IL-6表達(dá)顯著升高(P<0.01)。較之模型組,水飛薊素(150 mg/kg、200 mg/kg)能夠顯著改善肝臟組織的脂肪變性(P<0.05或P<0.01);與模型組比較,水飛薊素(200 mg/kg)能夠顯著降低血清ALT、AST、TBIL含量(P<0.05);與模型組比較,水飛薊素各劑量組肝勻漿MDA含量顯著下降(P<0.01),GPx活性升高(P<0.05),水飛