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1、第一部分,包皮的機(jī)械屏障機(jī)制研究
背景:在非洲的三項(xiàng)大樣本流行病學(xué)調(diào)查(烏干達(dá)、肯尼亞、南非)已經(jīng)證實(shí):包皮環(huán)切術(shù)后,男性的HIV感染率明顯降低。因此WHO宣布包皮環(huán)切術(shù)降低60%的HIV感染率。但是其機(jī)理一直不清。在臨床中,包皮內(nèi)板比包皮外板更容易破損,包莖患者包皮狹窄環(huán)處的包皮內(nèi)板尤其容易破損。為此,我們采用生物力學(xué)和病理檢測(cè)相結(jié)合,以期探討包皮內(nèi)板和包皮外板的強(qiáng)度差異。
目的:1.在縱向、橫向及垂直方向
2、分別測(cè)量成人包皮內(nèi)板、外板復(fù)合組織的極限抗拉強(qiáng)度和剪切力,從生物力學(xué)角度尋找包皮內(nèi)板容易破損的機(jī)制。2.從角質(zhì)層屏障角度探討包皮環(huán)切術(shù)降低HIV感染率的機(jī)制。比較包皮內(nèi)板和外板角質(zhì)層厚度,并與陰莖其他部位的角質(zhì)層厚度比較。比較包皮、口腔粘膜、陰道粘膜、小陰唇內(nèi)側(cè)皮膚等性行為中容易摩擦部位的角質(zhì)層厚度。3.比較上述這些組織的上皮層厚度、上皮細(xì)胞層數(shù),查看角質(zhì)層厚度與上皮層有無(wú)關(guān)系。
方法:包皮組織均采自北京大學(xué)第一醫(yī)院男科中
3、心門診行包皮環(huán)切手術(shù)的44位成年男性患者?;颊吣挲g15~54歲,平均年齡26.9±6.8歲。(1).將矩形試件(包皮復(fù)合組織切成橫行、縱行)固定在試驗(yàn)機(jī)的夾具上,以相同的加載速度10mm/min拉長(zhǎng)試件直至完全斷裂。計(jì)算橫向、縱向的載荷強(qiáng)度和剛度。(2).將正方形包皮復(fù)合組織試件固定在試驗(yàn)機(jī)的夾具上,壓頭以相同的加載速度10mm/min向下方移動(dòng),直至試件破裂。計(jì)算剪切力和位移。
10%福爾馬林固定切取的包皮組織3d。以包
4、皮內(nèi)、外板交界處為標(biāo)志,對(duì)稱性切取包皮內(nèi)板、包皮外板的橫行、縱行標(biāo)本。HE染色后,測(cè)量上皮角質(zhì)層厚度,隨機(jī)選取4例包皮做免疫組化方式來(lái)驗(yàn)證。用HE染色并比較包皮、口腔粘膜、陰道粘膜、小陰唇內(nèi)側(cè)皮膚等性行為中容易摩擦部位的上皮層厚度、上皮細(xì)胞層數(shù),查看角質(zhì)層厚度與上皮層有無(wú)關(guān)系。
結(jié)果:
1.共檢測(cè)22對(duì)新鮮包皮組織的縱向斷裂負(fù)荷和位移,結(jié)果包皮內(nèi)板復(fù)合組織為1.046±0.3367N,包皮外板復(fù)合組織為1.3
5、56±0.4345N(P<0.01)。包皮內(nèi)板復(fù)合組織的位移為9.56±4.12mm,包皮外板復(fù)合組織為9.18±3.47mm(P>0.05)。
2.共檢測(cè)20對(duì)新鮮包皮組織的橫向斷裂負(fù)荷和位移,結(jié)果包皮內(nèi)板復(fù)合組織橫向極限抗?fàn)坷瓘?qiáng)度為0.99±0.50N,包皮外板復(fù)合組織為1.75±0.55N(P<0.001)。包皮內(nèi)板、外板復(fù)合組織的橫向斷裂位移分別為10.00±5.60mm、12.07±3.92mm(P>0.05)。
6、
3.共檢測(cè)11對(duì)新鮮包皮組織的剪切力和位移,結(jié)果包皮內(nèi)板復(fù)合組織的剪切力為0.79±0.25N,包皮外板復(fù)合組織為1.55±0.71N(P<0.01)。包皮內(nèi)板和外板復(fù)合組織的位移為4.90±1.46mm、6.66±2.30mm(p<0.05)。
4.7例縱向標(biāo)本中,包皮內(nèi)板(外板)角質(zhì)層厚度為6.83±1.40μm、11.43±3.10μm(p<0.05)。
5.12例橫向包皮標(biāo)本,包皮內(nèi)板
7、遠(yuǎn)端角質(zhì)層厚度為7.04±3.08μm,比內(nèi)板近端角質(zhì)層薄(10.83±8.02μm,P<0.05),也比包皮外板遠(yuǎn)端(11.30±2.31μm,P<0.05=、外板近端角質(zhì)層(12.63±2.51μm,P<0.05)薄。
6.7例縱向包皮內(nèi)板、外板的上皮層厚度分別為68.81±8.03μm、75.72±10.42μm(P>0.05)。12例遠(yuǎn)端橫向包皮內(nèi)板、外板的上皮層厚度分別為93.92±26.33μm、93.52μm
8、±16.14μm(P>0.05)。12例近端橫向包皮內(nèi)板、外板的上皮層厚度分別為107.80±28.67μm、87.12±14.76μm(P>0.05)。10例口腔粘膜的上皮層厚度均值為270.1±668.4μm,比包皮內(nèi)板、外板厚(P<0.05)。7例陰道粘膜的上皮層厚度均值為185.7±79.0μm,比包皮內(nèi)板、外板厚(P<0.05)。
結(jié)論:
1.包皮內(nèi)板復(fù)合組織的韌性強(qiáng)度比包皮外板復(fù)合組織低。排除皮下
9、組織的影響,可能包皮內(nèi)板粘膜的韌性強(qiáng)度比包皮外板低。包皮內(nèi)板、外板復(fù)合組織的韌性強(qiáng)度遠(yuǎn)低于腹部、胸部的正常皮膚。包皮內(nèi)、外板組織的彈性無(wú)顯著差異。
2.包皮內(nèi)板的角質(zhì)層比包皮外板薄(P<0.05),而包皮外板的角質(zhì)層/上皮細(xì)胞層數(shù)沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。這對(duì)于包皮環(huán)切術(shù)有一定的指導(dǎo)意義,即切除較多的包皮內(nèi)板,可能減少性生活時(shí)外力導(dǎo)致的局部損傷,而切除較多的包皮外板在減少局部損傷的意義可能不大。
3.包皮
10、內(nèi)板、包皮外板的上皮層比口腔粘膜、陰道粘膜薄,可能更容易破損。
第二部分,包皮的免疫屏障機(jī)制研究
目的:比較包皮內(nèi)板和外板朗格漢斯細(xì)胞,并與陰莖其他部位比較;比較包皮、口腔粘膜、陰道粘膜、小陰唇內(nèi)側(cè)皮膚等性行為中容易摩擦部位的朗格漢斯細(xì)胞;從HIV靶細(xì)胞角度探討包皮環(huán)切術(shù)降低HIV感染率的機(jī)制。
方法:成年男性包皮標(biāo)本10例,患者年齡18~45歲。3例包莖及4例慢性包皮炎癥病例,采自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)
11、院整形外科醫(yī)院門診手術(shù)室,年齡分別為33、32、62歲。陰莖標(biāo)本1例,年齡為20歲??谇徽衬?biāo)本12例,包括5例齦頰溝粘膜,3例頰粘膜,4例唇粘膜,年齡為25.5±7.5歲。陰道粘膜標(biāo)本7例,年齡為39.1±10.5歲。所有患者均簽署知情同意書。標(biāo)本做朗格漢斯細(xì)胞染色,在光鏡下分別計(jì)算包皮內(nèi)板、包皮外板、陰莖標(biāo)本、陰道粘膜、口腔粘膜、小陰唇皮膚的上皮層朗格漢斯細(xì)胞(以下簡(jiǎn)稱LC細(xì)胞)計(jì)數(shù)及和上皮角質(zhì)層的距離。
結(jié)果:
12、> 1.10例外觀正常的包皮標(biāo)本中,7例包皮內(nèi)板的平均LC細(xì)胞密度為167.3±23.0個(gè)/mm2,10例包皮外板為65.1±20.7個(gè)/mm2(P<0.05=。4例有慢性炎癥或者伴有局部破損的包皮內(nèi)板為261.1±31.3個(gè)/mm2(P<0.05=。7例包皮內(nèi)板的LC細(xì)胞平均距離上皮角質(zhì)層的距離為25.60±5.11μm。10例包皮外板為35.35±6.16μm,經(jīng)t檢驗(yàn)(P<0.05)。7例包皮內(nèi)板染色正常的標(biāo)本中,其包皮外板
13、LC細(xì)胞平均距離上皮角質(zhì)層的距離為34.23±3.23μm(P<0.05=。
2.6例陰道粘膜中,平均LC細(xì)胞密度為87.2±35.2個(gè)/mm2,LC細(xì)胞平均距離上皮角質(zhì)層的距離為88.96±41.24μm。檢測(cè)1例小陰唇,內(nèi)側(cè)面密度為52.8個(gè)/mm2,外側(cè)面密度為37.2個(gè)/mm2。LC細(xì)胞平均距離上皮角質(zhì)層的距離為91.94±34.47μm。
3.11例口腔粘膜中,平均LC細(xì)胞密度為79.2±31.7個(gè)
14、/mm2。LC細(xì)胞平均距離上皮角質(zhì)層的距離為91.94±34.47μm。
結(jié)論:
1.包皮內(nèi)板(167.3±23.0個(gè)/mm2)的LC密度比包皮外板(65.1±20.7個(gè)/mm2)、陰道粘膜(87.2±35.2個(gè)/mm2)、口腔粘膜(79.2±31.7個(gè)/mm2)高,P<0.05。
2.包皮內(nèi)板(25.60±5.11m)的LC到上皮角質(zhì)層的距離,比包皮外板(35.35±6.16μm、陰道粘膜(8
15、8.96±41.24μm)、口腔粘膜(91.94±34.47μm)高,P<0.05。
3.處于慢性炎癥期間或伴有局部破損的包皮內(nèi)板LC細(xì)胞密度(261.1±31.3個(gè)/mm2)明顯高于正常組的包皮內(nèi)板(167.3±23.0個(gè)/mm2)及包皮外板(65.1±20.7個(gè)/mm2),P<0.05。
4.總結(jié):包皮內(nèi)板比其他組織的LC細(xì)胞多,距離上皮角質(zhì)層更近,因此感染HIV病毒的概率相對(duì)較高。處于慢性炎癥期間或伴有
16、局部破損的包皮內(nèi)板可能更容易感染HIV病毒。
第三部分,包皮內(nèi)板環(huán)切術(shù)治療包莖及包皮過(guò)長(zhǎng)的臨床應(yīng)用
目的:
旨在探索一種手術(shù)創(chuàng)傷小、切除組織量小、手術(shù)并發(fā)癥小,且最大限度減低HIV感染率的包皮環(huán)切手術(shù)方式。
方法:
自2009年5月至2012年1月,中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院整形十科門診及住院手術(shù)室共收治54例包皮過(guò)長(zhǎng)及包莖患者,年齡5~62歲。對(duì)于單純包皮過(guò)長(zhǎng)患者,
17、行包皮內(nèi)板環(huán)切術(shù);對(duì)于包莖患者,同時(shí)結(jié)合背側(cè)及腹側(cè)包皮縱行切開松解術(shù)。
結(jié)果:
1.1例患者出現(xiàn)陰莖背側(cè)切口裂開,經(jīng)換藥后愈合,其余53例均成功。術(shù)后7天拆線,膠原蛋白線一般6~10天自行脫落。術(shù)后包皮無(wú)明顯水腫、出血、血腫、切口感染等并發(fā)癥。術(shù)后陰莖外形自然,系帶完整保留,無(wú)系帶感覺(jué)異常、切口瘢痕不明顯。
2.HE染色顯示,切除的包皮內(nèi)板組織平均厚度為354.5±88.2μm,與傳統(tǒng)包皮環(huán)切術(shù)
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