牛外周血淋巴細(xì)胞對(duì)輸卵管上皮細(xì)胞和卵泡顆粒細(xì)胞凋亡及生長(zhǎng)的影響.pdf

1、本試驗(yàn)?zāi)康氖茄芯客庵苎馨图?xì)胞對(duì)輸卵管上皮細(xì)胞和卵泡顆粒細(xì)胞周期和凋亡的影響。將分離出的外周血淋巴細(xì)胞分別與等量純化后的輸卵管上皮細(xì)胞、卵泡顆粒細(xì)胞按照10：1、5：1、3：1、1：1不同比率接種于24孔培養(yǎng)板共培養(yǎng)4天，以單獨(dú)培養(yǎng)的輸卵管上皮細(xì)胞及卵泡顆粒細(xì)胞作為對(duì)照組。用倒置顯微鏡觀察輸卵管上皮細(xì)胞基本生長(zhǎng)狀況；臺(tái)盼藍(lán)染色了解細(xì)胞成活率；細(xì)胞以碘化丙啶染色法處理，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)輸卵管上皮細(xì)胞和卵泡顆粒細(xì)胞周期及凋亡情況。結(jié)果表明：

2、外周血淋巴細(xì)胞與輸卵管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，對(duì)上皮細(xì)胞凋亡有促進(jìn)作用，各個(gè)試驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01)。其中5：1組凋亡率最高，10：1組最低，3：1組與1：1組差異不顯著(P>0.05)，其它每?jī)山M比較差異顯著(p<0.05)。表明外周血淋巴細(xì)胞與上皮細(xì)胞的比率決定其凋亡率；外周血淋巴細(xì)胞與顆粒細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，抑制卵泡顆粒細(xì)胞的凋亡，其中10：1組和3：1組凋亡率明顯低于對(duì)照組，兩組表現(xiàn)出顯著性差異(P<0.05)，其中10

3、：1組與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)，而5：1組、1：1組和對(duì)照組相互無(wú)顯著性差異(P>0.05)。表明外周血淋巴細(xì)胞與顆粒細(xì)胞的比率決定其凋亡率。 為研究在共培養(yǎng)體系中加入PHA對(duì)輸卵管上皮細(xì)胞及卵泡顆粒細(xì)胞凋亡的影響，先進(jìn)行了PHA對(duì)輸卵管上皮細(xì)胞和卵泡顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡影響的研究。結(jié)果表明：培養(yǎng)基中加入PHA對(duì)卵泡顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)顯著影響(P>0.05)，對(duì)其凋亡差異極顯著(P<0.01)；但試驗(yàn)組S期比例高于對(duì)照組，表

4、現(xiàn)出顯著性差異(P<0.05)，推斷出PHA對(duì)上皮細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用。 介于外周血淋巴細(xì)胞與輸卵管上皮不同比率共培養(yǎng)的結(jié)果，用外周血淋巴細(xì)胞分別與第四代、第八代輸卵管上皮細(xì)胞以5：1的比率進(jìn)行共培養(yǎng)4天，并在培養(yǎng)基中加入PHA，細(xì)胞以Hoechst 33342/PI染色法處理，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)上皮細(xì)胞凋亡。用來(lái)說(shuō)明共培養(yǎng)體系中加入PHA對(duì)輸卵管上皮細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明：不同代數(shù)的上皮細(xì)胞試驗(yàn)組凋亡率接近于對(duì)照組。推測(cè)加入PH