ACTA2啟動(dòng)子區(qū)SNPs與2型糖尿病患者冠脈病變的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、研究背景:
　　與2型糖尿病相關(guān)的冠狀動(dòng)脈性心臟病的發(fā)生率和病死率呈上升趨勢(shì),因此2型糖尿病相關(guān)的冠狀動(dòng)脈性心臟病逐漸成為公眾健康問(wèn)題的焦點(diǎn)。
　　由ACTA2基因編碼的肌動(dòng)蛋白α是收縮型血管平滑肌細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白。血管平滑肌細(xì)胞由收縮表型向合成表型的轉(zhuǎn)化過(guò)程在冠脈病變中起非常重要的作用。Wang等發(fā)現(xiàn)血管平滑肌細(xì)胞從分化成熟的收縮表型向去分化狀態(tài)的合成表型轉(zhuǎn)化時(shí)伴隨血管平滑肌細(xì)胞的遷移以及增殖行為,并且肌動(dòng)蛋白α的含量以及

2、其轉(zhuǎn)錄表達(dá)的mRNA均明顯減少。因此,在冠狀動(dòng)脈病變的病因研究中對(duì) ACTA2基因的研究尤為重要。Guo等對(duì)病變血管進(jìn)行病理分析以及對(duì)血管平滑肌細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn),攜帶 ACTA2突變基因者發(fā)生血管堵塞或者血管擴(kuò)張類心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)性更高
　　研究陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多種心血管疾病危險(xiǎn)因子相關(guān)基因啟動(dòng)子區(qū)的單核苷酸多態(tài)性(SNPs,single nucleotide polymorphisms)與2型糖尿病患者心血管疾病的發(fā)生相關(guān),如脂連

3、素、TNF-α等相關(guān)基因。ACTA2基因啟動(dòng)子區(qū)中是否也存在類似單核苷酸多態(tài)性呢?假設(shè)ACTA2基因啟動(dòng)子區(qū)某些單核苷酸多態(tài)性可能參與調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白α的轉(zhuǎn)錄過(guò)程,從而通過(guò)改變血管平滑肌細(xì)胞的肌動(dòng)蛋白α含量轉(zhuǎn)變血管平滑肌細(xì)胞的表型,其伴隨的血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移等行為參與了冠狀動(dòng)脈性心臟病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。所以很可能這些單核苷酸多態(tài)性與2型糖尿病患者冠狀動(dòng)脈的病變有一定關(guān)聯(lián)性。
　　目前,血清胰島素的促冠脈病變作用仍然存在很大爭(zhēng)議。那

4、么血清胰島素是否與這些單核苷酸多態(tài)性相互作用參與2型糖尿病患者冠狀動(dòng)脈的病變過(guò)程?
　　研究目的:
　　明確ACTA2基因啟動(dòng)子區(qū)單核苷酸多態(tài)性與2型糖尿病患者冠狀動(dòng)脈造影病變是否關(guān)聯(lián),并且進(jìn)一步分析血漿胰島素是否參與冠狀動(dòng)脈病變過(guò)程。
　　研究方法:
　　1.篩選出ACTA2基因啟動(dòng)子區(qū)中的8個(gè)符合條件的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn),將其人為分布在4個(gè)目的基因片段上,針對(duì)性設(shè)計(jì)并合成PCR擴(kuò)增引物以及測(cè)序引物;
　

5、　2.根據(jù)入選標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)納入研究對(duì)象251例,收集患者臨床信息以及實(shí)驗(yàn)室信息;
　　3.采集研究對(duì)象外周靜脈血,提取基因組DNA;
　　4.將目標(biāo)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)所在的基因片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,回收標(biāo)本PCR產(chǎn)物并進(jìn)行基因測(cè)序。
　　研究結(jié)果:
　　1.8個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)中僅rs1324551單核苷酸多態(tài)性分布在病例組和對(duì)照組間存在顯著差異性(P<0.05)。Rs1324551位點(diǎn)的G等位基因頻率和GG基

6、因型頻率在病例組和對(duì)照組中頻率分別依次是61.9％、52.4%和39.9%、25.3%,病例組中的G等位基因頻率和GG基因型頻率均明顯高于對(duì)照組(P=0.044、P=0.001)。Rs1324551位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性分布在三支以上病變組和兩支以下病變組間不存在顯著差異性(P>0.05)。
　　2.扣除混雜危險(xiǎn)因素等作用后,在附加模型(Additive model)和隱性模型(Recessive model)中GG基因型促冠狀動(dòng)脈

7、狹窄的OR值分別為2.93(95%CI:1.05~8.19,P=0.04)、2.34(95%CI:1.09~5.02,P=0.03),并且該相關(guān)性僅表現(xiàn)在低胰島素組中。
　　3.2型糖尿病患者病例組中的三支以上冠狀動(dòng)脈病變比例高達(dá)65.5%。
　　4.隱性模型(Recessive model)中,年齡和吸煙兩項(xiàng)危險(xiǎn)因素促冠狀動(dòng)脈狹窄病變的調(diào)整后OR值分別是1.06(95%CI1.02~1.20, P=0.007)、10.59

8、(95%CI1.27~88.11, P=0.03),但并未發(fā)現(xiàn)其他傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素的促冠狀動(dòng)脈狹窄病變作用。
　　結(jié)論:
　　1. Rs1324551位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性與冠狀動(dòng)脈病變的彌漫程度沒(méi)有相關(guān)性,僅僅與冠狀動(dòng)脈狹窄程度密切相關(guān),提示rs1324551 GG基因型增加2型糖尿病患者冠狀動(dòng)脈狹窄病變的風(fēng)險(xiǎn)性;
　　2. Rs1324551位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性與冠狀動(dòng)脈狹窄程度的關(guān)聯(lián)性只表現(xiàn)在低胰島素組中,提示血清胰島