杜仲木脂素對(duì)Ang Ⅱ誘導(dǎo)大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)合成的影響.pdf

1、目的:研究杜仲木脂素對(duì)血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導(dǎo)大鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖和細(xì)胞外基質(zhì)合成的影響，闡明杜仲木脂素保護(hù)高血壓腎損害的具體機(jī)制。
　　 方法:采用大鼠腎小球系膜（HBZY-1）細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為7組:對(duì)照組、AngⅡ誘導(dǎo)組(10-8 mol/L AngⅡ)、依帕司他組（10-8 mol/L AngⅡ+20μmol/L依帕司他）、氯沙坦組（10-8 mol/L AngⅡ+20μmol/L氯沙坦）、低濃度杜仲木脂素組(10-8

2、mol/L AngⅡ+20 mg/L杜仲木脂素)、中濃度杜仲木脂素組(10-8 mol/L AngⅡ+40 mg/L杜仲木脂素)和高濃度杜仲木脂素組(10-8 mol/L AngⅡ+80 mg/L杜仲木脂素)。各組細(xì)胞在含1％新生牛血清培養(yǎng)基中孵育48 h，采用MTT一步法檢測(cè)A490值來評(píng)估細(xì)胞數(shù);采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-qPCR)法和蛋白質(zhì)印跡(Westernblot)法檢測(cè)細(xì)胞外基質(zhì)Ⅰ型膠原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型膠原

3、蛋白(ColⅢ)、Ⅳ膠原蛋白(ColⅣ)、纖連蛋白(FN)以及醛糖還原酶(AR)的mRNA和蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 (1)與對(duì)照組相比，10-8 mol/L AngⅡ組細(xì)胞數(shù)增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(1.76±0.06 vs1.67±0.05，P＜0.05)。與AngⅡ組比較，氯沙坦組(1.63±0.04 vs1.76±0.06，P＜0.01)、依帕司他組(1.65±0.04 vs1.76±0.06，P＜0.

4、01)和不同濃度木脂素組(1.68±0.05，1.58±0.07，1.59±0.07 vs1.76±0.06，P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01)細(xì)胞數(shù)減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (2)與對(duì)照組相比，10-8 mol/L AngⅡ能夠顯著增加ColⅣ(2.33±0.13 vs1.00±0.31, P＜0.01)、FN(1.17±0.04vs1.00±0.08,P＜0.01)、ColⅠ(1.36±0.05vs1.00±

5、0.05,P＜0.01)、ColⅢ(1.31±0.03 vs1.00±0.04, P＜0.01)和AR(1.35±0.04 vs1.00±0.11, P＜0.01)mRNA水平。
　　 與AngⅡ組相比，氯沙坦可明顯降低ColⅣ(1.28±0.09 vs2.33±0.13, P＜0.01)、FN(0.79±0.03vs1.17±0.04, P＜0.01)、ColⅠ(1.07±0.11 vs1.36±0.05, P＜0.01)、C

6、olⅢ(1.11±0.04vs1.31±0.03,P＜0.01)和AR（1.22±0.03vs1.35±0.04，P＜0.05）mRNA水平，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 與AngⅡ組比較，低中高濃度木脂素均顯著降低FN(0.86±0.06,0.90±0.03,0.67±0.01 vs1.17±0.04,P＜0.01)、ColⅠ(0.75±0.01,0.67±0.05,0.55±0.01 vs1.36±0.05,P＜0.01)、C

7、olⅢ(0.78±0.07,0.34±0.02,0.18±0.01 vs1.31±0.03,P＜0.01)和AR(1.08±0.03,0.98±0.09,0.86±0.08 vs1.35±0.04,P＜0.01)mRNA水平，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;高濃度木脂素組顯著減少ColⅣmRNA(1.51±0.21 vs2.33±0.13,P＜0.01)水平，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，低中濃度木脂素組(1.76±0.77,1.66±0.62 vs2.33

8、±0.13,P=0.084,P=0.134)具有降低趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 與AngⅡ組相比，依帕司他組FN(0.76±0.03 vs1.17±0.04,P＜0.01)、ColⅠ(1.25±0.05 vs1.36±0.05,P＜0.05)和ColⅢ(0.68±0.02 vs1.31±0.03,P＜0.01)mRNA水平明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;AR(3.78±0.13 vs1.35±0.04,P＜0.01)，差異具

9、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;ColⅣ(2.54±0.14 vs2.33±0.13,P=0.275)mRNA水平上升，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3)與對(duì)照組相比，10-8 mol/L AngⅡ能夠顯著增加ColⅣ(2.18±0.26 vs1.00±0.02, P＜0.01)、FN(2.43±0.03 vs1.00±0.07,P＜0.01)、ColⅠ(1.29±0.05 vs1.00±0.04,P＜0.01)、ColⅢ(5.08±0.21

10、 vs1.00±0.43,P＜0.01)和AR(2.02±0.08 vs1.00±0.08,P＜0.01)蛋白水平。
　　 與AngⅡ組相比，氯沙坦組ColⅣ(0.47±0.15 vs2.18±0.26,P＜0.01)、FN(0.17±0.01 vs2.43±0.03,P＜0.01)、ColⅠ(0.47±0.02vs1.29±0.05,P＜0.01)、ColⅢ(0.91±0.36 vs5.08±0.21,P＜0.01)和AR(0

11、.35±0.15 vs2.02±0.08,P＜0.01)蛋白水平降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 與AngⅡ組比較，低中高濃度木脂素均顯著降低ColⅣ(1.71±0.07,1.58±0.08,0.50±0.14 vs2.18±0.26,P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)、FN(0.19±0.09,0.40±0.12,0.20±0.10 vs2.43±0.03,P＜0.01)、ColⅠ(0.76±0.01,0.71±0.0

12、2,0.66±0.02 vs1.29±0.05,P＜0.01)、ColⅢ(2.78±0.21,1.94±0.37,1.44±0.39 vs5.08±0.21,P＜0.01)和AR(0.52±0.17,0.66±0.22,0.45±0.23 vs2.02±0.08，P＜0.01)蛋白水平，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 與AngⅡ組相比，依帕司他組FN(2.07±0.06 vs2.43±0.03，P＜0.01)、ColⅠ(1.07±0

13、.02 vs1.29±0.05,P＜0.01)和ColⅢ(1.12±0.46 vs5.08±0.21，P＜0.01)蛋白水平下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;ColⅣ(2.71±0.42 vs2.18±0.26,P＜0.01)和AR(3.13±0.24 vs2.02±0.08，P＜0.01)蛋白水平上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:
　　 (1) AngⅡ促進(jìn)HBZY-1中ColⅢ和AR表達(dá)，氯沙坦對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的ColⅢ