水稻BADH2基因RNA干涉表達載體的構建與遺傳轉化.pdf

1、甜菜堿是植物在鹽、干旱或其它脅迫下在細胞中迅速積累的一種相容性有機小分子化合物，它在細胞中的積累與植物抗鹽性的提高密切相關。大多數(shù)生物體內(nèi)的甘氨酸甜菜堿的合成需要兩步反應。其中，甜菜堿醛脫氫酶(betaine aldehyde dehydrogenase，BADH)催化甜菜堿醛生成甘氨酸甜菜堿。 水稻是世界上重要的糧食作物之一，對鹽脅迫較敏感。稻田鹽堿化是造成水稻減產(chǎn)的主要環(huán)境因素之一。所以對水稻耐鹽性的研究和改良是當今農(nóng)業(yè)發(fā)展

2、的重要研究課題之一。眾多研究結果都表明，BADH基因家族和植物的耐鹽性抗旱性有關。在很多單子葉植物(包括水稻)中，都發(fā)現(xiàn)與雙子葉植物BADH功能相似的兩個同源基因BADH1及BADH2。推測這兩個同源基因也與植物耐鹽抗旱有關。 本實驗室構建了水稻BADH2的RNAi載體，并利用農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導法將其導入多個水稻品種幼胚、成熟胚誘導的愈傷組織，再生形成完整的轉基因水稻植株。實驗表明，

3、不同外植體來源影響愈傷組織的誘導和轉化，并且愈傷組織的誘導和轉化效果受基因型的影響。在農(nóng)桿菌轉化過程中，潮霉素和除草劑都是較好的篩選劑，前者篩選所得的抗性愈傷分化成苗所需時間較短；但后者篩選所得的抗性愈傷形成的苗更健壯。T<,0>代PCR檢測表明，通過轉化確已獲得一定數(shù)量的轉基因植株，為進一步研究水稻BADH2基因的功能奠定了基礎。通過對陽性轉化株及對照株進行鹽脅迫試驗，比較在相同濃度NaCl脅迫下陽性轉化株幼苗和野生型對照幼苗的株高、