室旁核中活性氧在慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓大鼠中的作用及其調(diào)控機(jī)制.pdf

1、背景：
　　阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(OSAS)是一種常見的睡眠呼吸調(diào)節(jié)障礙性疾病。間歇性低氧是OSAS的主要病理生理學(xué)特點(diǎn),同時(shí)也是引起高血壓的重要因素之一。間歇性低氧引起的高血壓與過度增強(qiáng)的交感神經(jīng)活動(dòng)有關(guān),但中樞機(jī)制尚不明確。室旁核(PVN)是整合心血管活動(dòng)的重要核團(tuán),PVN功能異?？赡苁菍?dǎo)致間歇性低氧時(shí)交感神經(jīng)活動(dòng)增強(qiáng)的重要原因之一?；钚匝?ROS)在間歇性低氧誘發(fā)高血壓中起著重要作用,而中樞中的ROS可作為信號(hào)分子與間歇

2、性低氧時(shí)高血壓的產(chǎn)生有關(guān)。
　　目的：
　　1、探討PVN中ROS在慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓中的作用及其機(jī)制。
　　2、觀察降低或清除ROS對(duì)慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓的防治效果,為防治OSAS誘發(fā)的合并癥提供依據(jù)。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)采用慢性間歇性低氧模型,套尾法檢測(cè)大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓(SBP),在體記錄大鼠的平均動(dòng)脈壓(MAP)、心率(HR)和腎交感神經(jīng)活動(dòng)(RSNA),使用立體定位儀進(jìn)行核團(tuán)微量注射,

3、采用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)、NADHA氧化酶的活性和ROS的含量,以及Western Blot檢測(cè)PVN中SOD和NADPH氧化酶的蛋白表達(dá)。
　　1、慢性間歇性低氧對(duì)大鼠血壓和交感神經(jīng)活動(dòng)的影響
　　將雄性SD大鼠100只,體重220～250g,隨機(jī)分成對(duì)照組(Control)和慢性間歇性低氧模型組(chronic intermittent hypoxia,CIH),Control組除

4、不充入氮?dú)夂脱鯕馔?其余均與CIH做相同處理。CIH組大鼠放入間歇性低氧艙內(nèi),向低氧艙循環(huán)充入氮?dú)夂脱鯕?共15天。觀察慢性間歇性低氧對(duì)大鼠SBP、MAP和RSNA的影響。
　　2、慢性間歇性低氧對(duì)大鼠PVN中氧化應(yīng)激水平的影響
　　使用MDA試劑盒分別檢測(cè)Control組和CIH組大鼠PVN中丙二醛(MDA)的含量,觀察慢性間歇性低氧是否引起大鼠PVN中氧化應(yīng)激水平的升高。
　　3、慢性間歇性低氧對(duì)大鼠PVN中SOD

5、和NADPH氧化酶的活性及蛋白表達(dá)的影響
　　使用ELISA試劑盒檢測(cè)Control和CIH大鼠PVN中SOD和NADPH氧化酶活性的變化;使用Western Blot檢測(cè)Control和CIH大鼠PVN中SOD和NADPH氧化酶蛋白表達(dá)水平。
　　4、急性改變PVN中ROS水平對(duì)大鼠MAP和RSNA的影響
　　實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(Control)和慢性間歇性低氧模型組(CIH),分別在雙側(cè)PVN中注射超氧陰離子清除劑的類

6、似物Tempol(0.2mol/L)、NADPH氧化酶抑制劑APO(0.01mol/L)和SOD的抑制劑DETC(0.1mol/L)改變ROS的水平,觀察改變PVN中ROS的水平對(duì)大鼠MAP和RSNA的影響。
　　5、長(zhǎng)期應(yīng)用Tempol對(duì)慢性間歇性低氧大鼠血壓和交感神經(jīng)活動(dòng)的影響
　　實(shí)驗(yàn)分為Control組、CIH組、Control+Tempol組和CIH+Tempol組四組。Control+Tempol組和CIH+Te

7、mpol組每天飲用含Tempol(2mmol/L)的飲用水,Control組和CIH組每天飲用自來水。觀察Tempol通過降低ROS水平對(duì)慢性間歇性低氧大鼠血壓和交感神經(jīng)活動(dòng)的影響。
　　6、長(zhǎng)期應(yīng)用Tempol對(duì)大鼠PVN中ROS水平的影響
　　實(shí)驗(yàn)分為Control組、CIH組、Control+Tempol組和CIH+Tempol組四組。使用ELISA試劑盒檢測(cè)這四組PVN中ROS的含量,觀察長(zhǎng)期降低ROS水平對(duì)大鼠PV

8、N中ROS水平的影響。
　　結(jié)果：
　　1.慢性間歇性低氧可以引起SBP、MAP和RSNA明顯升高。
　　2.慢性間歇性低氧可以導(dǎo)致大鼠PVN中ROS水平的升高。
　　3.慢性間歇性低氧可使大鼠PVN中SOD的活性明顯降低;而NADPH氧化酶的活性無明顯變化。慢性間歇性低氧可引起SOD的表達(dá)顯著下降,NDAPH氧化酶蛋白表達(dá)水平升高。
　　4.雙側(cè)PVN中注射超氧陰離子清除劑Tempol(0.2mol/L)

9、和注射NADPH氧化酶抑制劑APO(0.01mol/L)均可以引起MAP、RSNA的明顯下降;雙側(cè)PVN中注射SOD的抑制劑DETC(0.1mol/L)可引起MAP、RSNA明顯增加。
　　5.長(zhǎng)期應(yīng)用Tempol,可以降低慢性間歇性低氧誘發(fā)的血壓升高和交感神經(jīng)活動(dòng)增強(qiáng),但不能降低到正常水平。
　　6.長(zhǎng)期應(yīng)用Tempol,可以降低慢性間歇性低氧導(dǎo)致PVN中ROS水平的升高,但未能恢復(fù)正常狀態(tài)。
　　結(jié)論：