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1、目的:檢測(cè)SOX15基因于結(jié)腸癌中的表達(dá)高低以及對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、侵襲的影響。
方法:RT-PCR被用于檢測(cè)SOX15在 Caco2、SW480、HT29、HCT116結(jié)腸癌細(xì)胞以及正常結(jié)腸組織中的表達(dá)程度高低。通過脂質(zhì)體Lipofectamine2000將重組質(zhì)粒pEGFP-N1-SOX15與空質(zhì)粒pEGFP-N1轉(zhuǎn)染入Caco2及SW480結(jié)腸癌細(xì)胞后,應(yīng)用RT-PCR及Western blot分別檢測(cè)SOX15在C
2、aco2及SW480細(xì)胞中mRNA以及蛋白質(zhì)表達(dá)水平;CCK-8檢測(cè)SOX15對(duì)Caco2及SW480細(xì)胞增殖的影響、克隆形成觀察癌細(xì)胞克隆形成率、流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率、Transwell檢測(cè)SOX15對(duì)細(xì)胞遷移、侵襲功能的調(diào)節(jié)控制。
結(jié)果:與人正常結(jié)腸組織相比,SOX15在Caco2、SW480、HT29、HCT116結(jié)腸癌細(xì)胞中mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平明顯低于其在正常結(jié)腸組織的表達(dá)水平。pEGFP-N1-SOX15轉(zhuǎn)染
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