過敏性紫癜外周血單個核細胞中Tim-1、Tim-3 mRNA的表達和外周血中Il-2、IL-4含量測定.pdf

1、目的:過敏性紫癜(Henoch-Schonleinpurpura，HSP)是兒童期常見的白細胞碎裂性血管炎。臨床上以非血小板減少性紫癜、關節(jié)腫脹、胃腸道受累和腎炎為主要表現，多見于學齡期，冬春季為發(fā)病高峰期。HSP發(fā)病機理尚未研究透徹，多認為由多因素所致，感染、食物或者藥物等都可作為致敏因素，近年來研究發(fā)現，HSP患者血清中IgA水平升高，血管壁有IgA免疫復合物(IgA-IC)沉積。Th細胞亞群功能失調在其發(fā)病機制中也起著非常重要的作

2、用。
　　 Th1細胞能增強巨噬細胞的吞噬作用，促進細胞免疫;Th2細胞可增強B細胞介導的體液免疫應答。Tim(Tcellimmunoglobindomainandmucindomainprotein)家族因其特殊的結構和表達特異性，可能成為Th1/Th2特異性表面標志之一，參與T細胞的分化及免疫應答調節(jié):Tim-1細胞主要表達在分化后的Th2細胞上，但在Th1細胞表面幾乎不表達，可誘導Th2活化增殖、促進細胞因子釋放、激發(fā)Th

3、2型免疫應答;Tim-3細胞則特異性表達在分化終末期的Th1細胞上，負調節(jié)Th1細胞介導的免疫應答。相應地，IL-2作為Th1型細胞因子、IL-4作為Th2型細胞因子，二者含量亦隨之發(fā)生變化。
　　 RT-PCR是一種基于傳統PCR檢測方法上的新技術，同時進行靶序列的擴增與熒光信號的檢測，有效解決傳統PCR定量只能在終點進行檢測和傳統PCR產物的污染問題，具有特異性強，操作簡便，重復性好等優(yōu)點。
　　 本研究通過RT-P

4、CR檢測過敏性紫癜患者外周血單個核細胞(PBMC)中Tim-1、Tim-3mRNA的表達水平，并用ELISA方法檢測外周血中IL-2、IL-4含量，探究Tim家族分子在過敏性紫癜發(fā)生中的作用，進一步闡明過敏性紫癜的發(fā)病機制。
　　 方法:所有的實驗對象均來自河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院。病例組28例過敏性紫癜患者，男16例，女12例，平均年齡(19.30±9.58)歲，病程2天-3月。其中19例單純型組（僅有皮疹），9例混合型組（有關節(jié)

5、腫痛、腹痛或蛋白尿中的一項或多項）。對照組為20例健康正常人，經統計學分析，病例組在性別、年齡上與對照組均無統計學差異。抽取研究對象外周靜脈血，采用SYBRGreen(I)RT-PCR技術檢測PBMC中Tim-1mRNA和Tim-3mRNA的表達狀況，并用ELISA方法檢測外周血中IL-2、IL-4含量。
　　 數據采用SPSS13.0軟件進行統計分析。正態(tài)分布數據IL-2、IL-4含量用均數±標準差（(x)±s）表示，組間比較

6、采用t檢驗;非正態(tài)分布數據Tim-1、Tim-3mRNA表達量RQ值用中位數（四分位間距）[MD(IQR)]表示，組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗，P＜0.05認為有統計學意義。
　　 結果:
　　 1.過敏性紫癜組與健康對照組Tim-1mRNA相對表達量RQ值分別為0.974(1.108)和0.760(0.514)，過敏性紫癜患者Tim-1mRNA的表達水平升高，有顯著性差異(P＜0.05)，而在過敏性紫癜患者中單

7、純型組和混合型組之間沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　 2.過敏性紫癜組與健康對照組Tim-3mRNA相對表達量RQ值分別為1.359(1.183)和1.604(1.177)，兩者無顯著性差異(P＞0.05)。過敏性紫癜患者中單純型組和混合型組之間亦沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　 3.過敏性紫癜組與健康對照組IL-2含量分別為188.517±12.867和202.759±20.903(pg/ml)，患者組IL

8、-2含量降低，有顯著性差異(P＜0.05)，過敏性紫癜組中單純型組和混合型組IL-2含量分別為193.225±11.758和177.531±7.922（pg/ml），兩者之間有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 4.過敏性紫癜組與健康對照組IL-4含量分別為73.046±8.750和62.301±11.232(pg/ml)，患者組IL-4含量升高，有顯著性差異(P＜0.05)，過敏性紫癜中單純型組和混合型組IL-4含量分別為70