過敏性紫癜腎炎患兒外周血Fas水平的表達(dá)及意義.pdf

1、背景與目的：過敏性紫癜腎炎(AnaphylactoidPurpuranephritis,Henoch-Schonleinpurpuranephritis,HSPN)是兒科常見的繼發(fā)性腎小球疾病，其發(fā)病率逐年增加，轉(zhuǎn)歸與腎病理類型密切相關(guān)，是小兒慢性腎功能衰竭的主要病因之一，嚴(yán)重危害兒童健康。HSPN發(fā)病機制尚未清楚，近年來隨著細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)以及醫(yī)學(xué)免疫學(xué)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡參與其發(fā)病；細(xì)胞凋亡(apoptosis)是指在一定生理

2、或病理條件下，細(xì)胞按自身規(guī)律嚴(yán)格有序地主動結(jié)束其生命的死亡過程。死亡誘導(dǎo)因子(Factorasscioatedsuicide，F(xiàn)as)/死亡誘導(dǎo)因子配體(Factorasscioatedsuicideligend，F(xiàn)asL)系統(tǒng)是引發(fā)細(xì)胞凋亡(Apoptosis)的重要途徑之一，F(xiàn)as為Ⅰ型跨膜蛋白，屬于腫瘤壞死因子(tumornecerosisfactor，TNF)超家族，廣泛分布于T、B淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞以及肝

3、、腎、肺等器官的實質(zhì)細(xì)胞上；FasL是細(xì)胞表面Ⅱ型跨膜蛋白，屬TNF家族，F(xiàn)asL主要分布于活化的T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞以及腎臟的系膜細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞中。Fas/FasL系統(tǒng)主要參與機體免疫細(xì)胞的陰性及陽性選擇，調(diào)節(jié)機體免疫應(yīng)答以及參與殺傷T細(xì)胞(celltoxiclymphocyte,CTL)的細(xì)胞毒作用。 已有大量資料顯示淋巴細(xì)胞凋亡異常參與了系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性硬化(MA)等

4、自身免疫性疾病的發(fā)病。新近的資料表明，在多種腎臟疾病中，包括IgA腎病、急性腎衰、移植腎排異等，均發(fā)現(xiàn)Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡參與它們的發(fā)病，而國內(nèi)外關(guān)于細(xì)胞凋亡在HSPN的發(fā)病研究的較少。為此，本實驗觀察了HSPN患兒外周血T淋巴細(xì)胞凋亡率、T淋巴細(xì)胞膜和中性粒細(xì)胞Fas陽性表達(dá)率以及血清可溶性Fas(solubleFactorassociatedsuicide，sFas)和可溶性Fas配體(solubleFactorassoc

5、iatedsuicide，sFasL)水平的改變，研究它們在HSPN發(fā)病中所起的作用，為臨床診斷提供檢驗指標(biāo)，為臨床治療及預(yù)后評估提供理論基礎(chǔ)。 方法：1.選擇HSPN組患兒70例(男48例，女22例，年齡3-15歲(9.18±2.88)，其中腎臟病理類型Ⅱ型(單純系膜增生病變)26例，Ⅲ型(系膜增生伴新月體形成＜50％)33例，Ⅳ型(系膜增生伴新月體50％-75％)11例；正常對照組32例(男17例，女15例)，年齡3-12歲

6、(6.79±3.28)；2.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測HSPN組和正常對照組外周血T淋巴細(xì)胞凋亡率、T淋巴細(xì)胞膜以及中性粒細(xì)胞膜Fas陽性表達(dá)率；3.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清sFas及sFasL表達(dá)水平。 結(jié)果：(1)外周血T淋巴細(xì)胞凋亡率、中性粒細(xì)胞膜及T淋巴細(xì)胞膜Fas陽性表達(dá)率：HSPN患兒外周血T淋巴凋亡率、T淋巴細(xì)胞膜Fas表達(dá)水平增高，與正常對照組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01,P＜0.01)；HSPN患兒

7、外周血中性粒細(xì)胞膜Fas表達(dá)水平顯著高于正常對照組，兩組之間比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)；HSPN組病理改變Ⅲ型患兒外周血T淋巴細(xì)胞Fas表達(dá)率高于Ⅱ型(P＜0.01)，Ⅳ型患兒外周血T淋巴細(xì)胞Fas表達(dá)率高于Ⅱ型、Ⅲ型(P＜0.01，P＜0.01)；(2)血清sFas、sFasL含量變化：HSPN組外周血清sFas、sFasL表達(dá)水平明顯高于正常對照組，兩組之間比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)；(3)HSPN組外周血T淋巴凋亡

8、率、T淋巴細(xì)胞膜、中性粒細(xì)胞膜Fas表達(dá)情況以及血清sFas含量、FasL含量之間的相關(guān)性分析：HSPN外周血T淋巴細(xì)胞凋亡率與T淋巴細(xì)胞Fas陽性表達(dá)率呈正相關(guān)(r=0.782,P＜0.01)；HSPN組外周血T淋巴細(xì)胞膜Fas陽性表達(dá)率與中性細(xì)胞膜Fas陽性表達(dá)率呈正相關(guān)(r=0.686，＜0.01)；HSPN患兒血清sFas含量與sFasL含量呈正相關(guān)(r=0.731,P＜0.01)；HSPN組患兒T淋巴細(xì)胞Fas表達(dá)率與血清sF

9、as含量呈正相關(guān)(r=0.666，P＜0.01)；HSPN患兒外周血中性細(xì)胞膜Fas陽性表達(dá)率與血清sFas含量呈正相關(guān)(r=0.560,P＜0.01)；腎小球病變等級的增加與T淋巴細(xì)胞膜Fas表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.848,P＜0.01)。 結(jié)論：(1)HSPN患兒急性期外周血T淋巴凋亡率、T淋巴細(xì)胞膜、中性粒細(xì)胞膜Fas表達(dá)水平明顯高于正常對照組，表明在HSPN患兒存在淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞凋亡亢進(jìn)。(2)HSPN患兒急性期

10、外周血清sFas表達(dá)水平增高可能源于T淋巴細(xì)胞膜、中性粒細(xì)胞膜Fas的高表達(dá)，提示HSPN患兒存在細(xì)胞凋亡亢進(jìn)，同時伴有sFas水平增高可為機體保護(hù)性反應(yīng)。(3)HSPN患兒外周血T淋巴細(xì)胞膜Fas增高水平與腎小球病理改變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。(4)HSPN患兒血清sFasL表達(dá)水平增高，且T淋巴細(xì)胞Fas陽性表達(dá)率與血清sFasL呈正相關(guān)，表明HSPN患兒存在淋巴細(xì)胞凋亡亢進(jìn)。(5)淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞凋亡亢進(jìn)及其引發(fā)的凋亡的淋巴細(xì)胞及中