SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞Tim-1及Tim-3基因的表達(dá)以及人Tim-3基因的克隆.pdf

1、Tim(T cell immuglobulin domain and mucin domain)基因編碼的蛋白是一類具有共同基序的跨膜糖蛋白，其基本結(jié)構(gòu)包括一個(gè)信號(hào)肽、免疫球蛋白樣區(qū)、粘蛋白樣區(qū)、跨膜區(qū)和有磷酸化位點(diǎn)的胞內(nèi)區(qū)。Tim家族位于人染色體5q32.2，共包括3個(gè)基因，分別是Tim-1，Tim-3及Tim-4。Tim家族可能是Th1/Th2特異性表面標(biāo)志，參與Th細(xì)胞的分化及免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)；Tim-1細(xì)胞主要表達(dá)在分化后的Th2細(xì)

2、胞上，Tim-3只表達(dá)在分化后的Th1細(xì)胞上；Tim家族在自身免疫病中表達(dá)變化及SNP研究提示其參與自身免疫病發(fā)生。 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種典型的自身免疫病，其特征是產(chǎn)生大量自身抗體和多系統(tǒng)受累。該病病因不明，以T細(xì)胞依賴性B細(xì)胞克隆活化和產(chǎn)生自身抗體、形成多種免疫復(fù)合物而導(dǎo)致組織損害為特征。Th細(xì)胞及其細(xì)胞因子在自身免疫病發(fā)病機(jī)制中有著非常重要的作用。有不少學(xué)者

3、認(rèn)為SLE是Th2型自身免疫病，但也有相反的觀點(diǎn)，認(rèn)為SLE患者血清中IFN-γ水平顯著增加，而且Th1占優(yōu)勢(shì)可加速狼瘡向自身免疫性疾病發(fā)展。Tim-1、Tim-3是否參與其中發(fā)生目前尚未見報(bào)道。 本研究通過熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR及半定量RT-PCR檢測(cè)SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood monoculear cells，PBMC)Tim-1、Tim-3及其他相關(guān)因子的表達(dá)水平，探討Tim-1、Tim

4、-3表達(dá)與SLE相關(guān)性，并研究Tim分子的表達(dá)動(dòng)力學(xué)，為進(jìn)一步闡明SLE的發(fā)病機(jī)制及Tim與SLE的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。為進(jìn)一步開展Tim-3相關(guān)研究，本研究的另一部分工作是克隆人Tim-3基因，為將來進(jìn)一步表達(dá)并更深入研究該基因準(zhǔn)備條件。第一部分sLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞Tim-1及Tim-3基因的表達(dá) 目的：通過熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR、半定量RT-PCR分析系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者與健康對(duì)照者PBMC中Tim-1、Tim-3及其他相

5、關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)差異，為進(jìn)一步闡明SLE的發(fā) 病機(jī)制及Tim與SLE的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。 結(jié)論：SLE患者PBMC中Tim-1mRNA表達(dá)顯著升高，與IL-lOmRNA表達(dá)呈正相關(guān)，提示SLE為Th2型自身免疫病；同時(shí)SLE患者PBMC中與免疫抑制相關(guān)的因子FoxP3及TGF-βl mRNA表達(dá)顯著降低，Tim-3配體galactin-9表達(dá)顯著升高，且T淋巴細(xì)胞增殖能力降低，提示SLE患者Thl/Th2失衡可能與上述因素有關(guān)。