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文檔簡介
1、目的:
探討凋亡相關(guān)蛋白Bcl-xl和Bax在深Ⅱ度燒傷愈合后不同時期增生性瘢痕(HS)中的表達(dá)特點(diǎn)。
對象和方法:
一、實(shí)驗(yàn)對象及分組
人體正常皮膚(NS)標(biāo)本10例,深Ⅱ度燒傷愈合后不同階段的增生性瘢痕(HS)皮膚40例。增生性瘢痕皮膚按其燒傷愈合后的時間不同分四組,即增生期組(燒傷愈合后1~6個月HS-A)、減退早期組(燒傷愈合后7~12月HS-B1)、減退晚期組(燒傷愈合后
2、13~18月HS-B2)、成熟期組(燒傷愈合后18個月以上HS-C)。NS為對照組。
二、方法
1、HE染色
5μm的連續(xù)石蠟切片,常規(guī)蘇木素-伊紅染色,酒精梯度脫水,二甲苯透明后封固,光鏡下觀察
2、免疫組織化學(xué)染色
應(yīng)用兔抗人Bcl-xl和Bax多克隆抗體,采用SABC法對不同階段增生性瘢痕(HS)及正常組織(NS)進(jìn)行免疫組化染色,光鏡下觀察Bcl-xl和Bax
3、蛋白的表達(dá)及陽性細(xì)胞的分布特點(diǎn)。鏡下計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞;顯微圖像分析系統(tǒng)測定細(xì)胞內(nèi)Bcl-xl和Bax蛋白的平均光密度值。
3、統(tǒng)計(jì)分析
計(jì)數(shù)免疫染色陽性細(xì)胞,計(jì)算陽性細(xì)胞率,光密度平均值及陽性細(xì)胞率均表示為-x±s,X2檢驗(yàn),分析組間陽性細(xì)胞率的差異。p<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
HE染色光鏡下觀察,HS-A組真皮層成纖維細(xì)胞大量增生,膠原纖維纖細(xì)、豐富,排列紊亂,皮膚附屬器消失
4、;HS-B組和HS-C組真皮層內(nèi)成纖維細(xì)胞逐漸減少,膠原纖維粗大,排列逐漸變規(guī)則。Bcl-xl和Bax蛋白主要表達(dá)在正常皮膚的表皮基底層和瘢痕皮膚真皮層的成纖維細(xì)胞胞漿,呈深棕黃色或深褐色。(1)HS-A和HS-B1組,Bcl-xl蛋白的平均光密度值及陽性細(xì)胞率均明顯高于其他時期(P<0.01);HS-B2組平均光密度值及陽性細(xì)胞率雖高于NS組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);HS-C組平均光密度值和陽性細(xì)胞率明顯低于其他時期(P<0.
5、01)。(2)增生期組瘢痕皮膚Bax蛋白的平均光密度值和陽性細(xì)胞率最高,減退早期組次之,兩組均明顯高于其他各組(P<0.01);減退晚期和成熟期組的瘢痕皮膚Bax蛋白的平均光密度值和陽性細(xì)胞率與正常皮膚組比較無顯著差別(P>0.05)。(3)HS-A和HS-B1組Bcl-xl蛋白的表達(dá)強(qiáng)度及陽性細(xì)胞率均高于Bax蛋白,而HS-B2、HS-C、NS組均低于Bax蛋白。
結(jié)論:
1、深Ⅱ度燒傷創(chuàng)面愈合后,Bcl-
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