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1、【目的】研究TMTP1-TAT-NBD對(duì)卵巢癌耐藥細(xì)胞系C13K及配對(duì)敏感細(xì)胞系OV2008的體外作用機(jī)制,為抑制卵巢惡性腫瘤探尋一種新的小分子靶向藥物。
【方法】FITC-TMTP1分別作用卵巢癌細(xì)胞系C13K和OV2008后,激光共聚焦顯微鏡觀察單肽親和力;MTT法檢測(cè)TMTP1-TAT-NBD對(duì)卵巢癌細(xì)胞系的增殖抑制情況;集落形成試驗(yàn)檢測(cè)TMTP1-TAT-NBD抑制卵巢癌細(xì)胞系克隆形成的情況;流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)TMTP1-
2、TAT-NBD對(duì)卵巢癌細(xì)胞系的凋亡作用;Western Blot法檢測(cè)TMTP1-TAT-NBD對(duì)卵巢癌細(xì)胞系中NF-κB蛋白的表達(dá);NF-κB激活-核轉(zhuǎn)運(yùn)法檢測(cè)TMTP1-TAT-NBD抑制卵巢癌細(xì)胞C13K中NF-κB基因的激活。
【結(jié)果】TMTP1對(duì)卵巢癌耐藥細(xì)胞C13K有靶向性,對(duì)其配對(duì)敏感細(xì)胞OV2008靶向性差。TMTP1-TAT-NBD可以明顯抑制卵巢癌細(xì)胞C13K和OV2008的增殖(P<0.05)和克隆形成(
3、P<0.05),并且能夠促進(jìn)兩株細(xì)胞的凋亡(P<0.05),且TMTP1-TAT-NBD的作用有濃度依賴性,同時(shí)TMTP1-TAT-NBD對(duì)C13K的作用較OV2008明顯。Western Blot法檢測(cè)TMTP1-TAT-NBD作用后的卵巢癌細(xì)胞C13K中的NF-κB蛋白的表達(dá),發(fā)現(xiàn)有明顯的下調(diào)(P<0.05),而OV2008中NF-κB蛋白表達(dá)無明顯改變。NF-κB激活-核轉(zhuǎn)運(yùn)檢測(cè)顯示TMTP1-TAT-NBD可明顯抑制NF-κB的
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