神經(jīng)顆粒素異位表達在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機制中的相關(guān)研究.pdf

1、目的：（1）建立可穩(wěn)定表達神經(jīng)顆粒素（Neurogranin，Ng）的細胞系，用于Ng表達對T細胞功能影響的體外研究，進一步研究Ng在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）的發(fā)病機制中發(fā)揮的作用。（2）研究神經(jīng)顆粒素（Neurogranin，Ng）在正常人外周血單個核細胞與外周血T細胞的表達情況，確定是否可以用外周血單個核細胞Ng表達量來近似代替外周血T細胞Ng表達量,并進一步明確Ng在T淋巴

2、細胞亞群的表達及定位。（3）比較Ng在SLE和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis，RA）中的表達情況，進一步研究Ng在SLE中的表達是否具有特異性。
　　方法:（1）克隆人Ng基因，構(gòu)建和包裝可表達Ng的慢病毒轉(zhuǎn)染體系，感染Jurkat細胞，利用實時熒光定量PCR技術(shù)驗證目的基因的表達。（2）收集正常人外周血60ml，淋巴細胞分離液提取外周血單個核細胞，利用流式細胞術(shù)分離得到CD4+T細胞，CD8+T細胞，采用

3、實時熒光定量PCR技術(shù)檢測外周血單個核細胞與外周血T細胞Ng的表達情況。（3）收集SLE、RA患者的外周血，利用實時熒光定量PCR技術(shù)驗證其外周血單個核細胞Ng基因的表達。
　　結(jié)果:(1)用表達Ng的慢病毒感染Jurkat細胞，實時熒光定量PCR技術(shù)驗證其可表達Ng基因。（2）正常人外周血T細胞與外周血單個核細胞的Ng表達量呈平行關(guān)系。（3）RA患者外周血單個核細胞Ng表達量與SLE患者外周血單個核細胞Ng表達量無明顯差異性。<