人巨細胞病毒編碼蛋白pUL23選擇性調(diào)控干擾素γ刺激基因的表達.pdf

1、目的：人巨細胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）是一種典型的β皰疹病毒，在人群中廣泛感染，HCMV UL23基因?qū)儆赨S22基因家族成員，它的編碼產(chǎn)物pUL23大小約為33 kDa，為病毒皮層組分之一。實驗室前期結(jié)果已經(jīng)表明，pUL23能夠抑制γ干擾素依賴的JAK/STAT1信號途徑，抵抗干擾素抗病毒作用，γ干擾素途徑調(diào)控著上千個基因，包括多種抗病毒基因的表達。本課題旨在探討pUL23對干擾素刺激基因表達的影響

2、，為闡明pUL23能夠抵抗γ干擾素抗病毒的分子機理奠定基礎(chǔ)。
　　方法：1）生物信息學(xué)方法預(yù)測受人巨細胞病毒調(diào)控的γ干擾素刺激基因，作為后續(xù)研究的候選基因。2）人巨細胞病毒Towne株和缺失UL23基因的Towne-delUL23病毒株分別感染HFF細胞，γ干擾素處理前后，采用q-PCR技術(shù)檢測干擾素刺激基因的mRNA表達水平，分析病毒感染過程中pUL23對干擾素刺激基因表達的影響。
　　結(jié)果：1）NextBio平臺篩選出9

3、個受γ干擾素調(diào)控，基因表達增加改變倍數(shù)較大，并與巨細胞病毒感染相關(guān)的γ干擾素刺激基因，IFI44L、IFP35、NMI、IFIT3、STAT1、IRF1、IRF7、OAS1、SP110和1個對γ干擾素信號途徑具有負調(diào)控作用的基因UBE2I，作為后續(xù)研究病毒蛋白pUL23調(diào)控的候選基因。2）Towne病毒感染組與Towne-delUL23病毒感染組相比，q-PCR實驗數(shù)據(jù)表明①對于IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因，γ干擾素

4、未處理時，pUL23對IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因的表達無顯著性影響，γ干擾素處理后，pUL23抑制IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因mRNA表達；②對于OAS1、SP110基因，γ干擾素未處理時，pUL23促進OAS1、SP110基因mRNA表達，干擾素處理后，pUL23抑制SP110 mRNA表達，但是，pUL23或促進或抑制OAS1基因的表達；③對于IRF1基因，γ干擾素處理前后，pUL23均能抑