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文檔簡介
1、目的:觀察微小microRNA-29b(miR-29b)反義寡核苷酸(ASODN)對體外人膀胱癌細胞株BIU87細胞生長的影響,探討反義微小miR-29b(AS-miR-29b)對膀胱癌BIU87細胞發(fā)生發(fā)展的可能機制。
方法:應用質(zhì)粒介導的反義寡核苷酸(AS-miR-29b)轉染人膀胱癌細胞株BIU87細胞。確定能夠轉染成功后,轉染后的膀胱癌細胞miRNA-29b相對表達量應用熒光定量PCR法檢測。然后分別通過MTT比色法、
2、transwell、流式細胞計數(shù)實驗分別檢測AS-miR-29b對BUI87細胞的增殖、侵襲能力、凋亡的影響,AS-miR-29b轉染組與轉染無義序列組和空白對照組相對比。
結果:1.質(zhì)粒介導的反義寡核苷酸(AS-miR-29b)可在膀胱癌BIU87細胞中成功表達,通過流式檢測轉染效率,其中1:3組轉染效率最高,達到55.7%。2.實時熒光定量PCR實驗,結果AS-miR-29b的表達在轉染組與陰性對照組及空白對照組相比,表達
3、明顯上調(diào),差異有顯著性(P<0.05)。3. MTT實驗細胞計數(shù)后,結果表明轉染 AS-miR-29b組與其他兩組相比,BIU87細胞生長速度減慢,細胞增殖受限,有顯著差異性(P<0.05)。4. Transwell行侵襲實驗,轉染AS-miR-29b組與轉染無義序列組和空白對照組相比,穿過基質(zhì)膠的細胞計數(shù)明顯減少,侵襲能力減弱,差異有顯著性(P<0.05)。5.流式細胞學檢測凋亡及壞死,BIU87細胞的凋亡和壞死比例在轉染 AS-mi
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