bFGF，缺血預處理對帶真皮下血管網(wǎng)皮片周緣血運建立的研究.pdf

1、目的：觀察堿性成纖維細胞生長因子bFGF和缺血預處理聯(lián)合應用于SD大鼠帶真皮下血管網(wǎng)皮片對細胞增殖，血管化進程，以及皮片成熟面積的影響。皮膚移植是手外科主要治療方法之一，移植皮片成功的基礎是皮片與受皮區(qū)之間的血運建立，而血管形成(即組織中新生血管的增殖和形成過程)是構(gòu)建這種血運關(guān)系的基礎和關(guān)鍵。缺血預處理和bFGF可以加速植皮區(qū)與受皮區(qū)之間的血運建立，提高皮片移植的成活率，對解決帶真皮下血管網(wǎng)皮片移植后因皮片較厚，從供區(qū)獲得血供的時間較

2、長，較困難，常出現(xiàn)局灶性表皮層或真皮層壞死，散在的水皰干枯脫痂后形成花斑等問題有積極意義。bFGF(堿性成纖維細胞生長因子)是人體內(nèi)最為有效的血管形成因子之一，是成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞及血管平滑肌細胞的高效促生長劑，能夠強烈促進新生毛細血管的形成，改善創(chuàng)面微循環(huán)，為組織修復提供所必須的氧和豐富的營養(yǎng)物質(zhì)。缺血預處理引起的皮片保護作用會立即產(chǎn)生并可維持24小時，加強了細胞對缺血的耐受能力，從而引發(fā)了缺血預處理的保護效應。本實驗主要是通過

3、研究帶真皮下血管網(wǎng)皮片基底血運被阻斷時皮片成活和邊緣血運的建立情況，為臨床提高帶真皮下毛細血管網(wǎng)皮片移植的成功率提供實驗依據(jù)和臨床依據(jù)。 方法：將40只健康SD大鼠隨機分為A、B、C、D四組。A組為對照組，B組為缺血預處理組，C組為缺血預處理加生理鹽水組，D組為缺血預處理加bFGF組。A組：鼠背脫毛、消毒，取1×1cm2，2×2cm2，3×3cm2正方形皮片，間距3厘米。帶真皮下血管網(wǎng)皮片的形成過程如下：逐層切開皮膚、皮下組織，

4、于深筋膜淺面將皮片掀起，創(chuàng)面徹底止血，用眼科剪修去皮片的大部分皮下組織，保留皮下脂肪約1.5～3mm(包括背部肉膜層，在背部肌膜的淺面進行)，皮片基底與受皮區(qū)基底塞入片狀硅膠膜以阻斷基底血供，將皮片對邊扭轉(zhuǎn)180度，直接原位縫合；B組：設計皮片同A組，皮片切取時，僅切透皮片四邊，于術(shù)后72小時再徹底游離皮片基底部，并掀起皮片，皮片基底與受皮區(qū)基底塞入片狀硅膠膜以阻斷基底血供，原位縫合；C組：設計皮片同A組，分別切透己設計好的皮片四邊，于

5、術(shù)后72小時后游離基底部，皮片基底與受皮區(qū)基底塞入片狀硅膠膜以阻斷基底血供，以生理鹽水浸泡皮片及受區(qū)周緣軟組織，原位縫合皮片；D：皮片設計同A組，分別切透已設計好的皮片四邊，術(shù)后72小時游離基底部，于皮片及受區(qū)創(chuàng)面周緣軟組織內(nèi)應用堿性成纖維細胞生長因子溶液36000AU/15mL bFGF浸泡10min后，皮片基底與受皮區(qū)基底塞入片狀硅膠膜以阻斷基底血供，原位縫合，7天后觀察皮片的各項指標。觀察指標：1、觀察皮片的顏色、質(zhì)地、彈性和邊緣

6、滲血情況。2、皮片成活面積：皮片形成后第1周，數(shù)碼相機記錄圖像分析測量皮片成活部分的最長徑、最寬徑，面積及面積成活百分比。3組織學觀察：于創(chuàng)緣周邊取病理切片，HE染色，于等寬的面積內(nèi)隨機選取5個高倍鏡視野，計算新生血管的數(shù)量及肉芽組織增生情況進行顯微鏡下觀察及數(shù)據(jù)測量。 結(jié)果：大體觀察：40只SD大鼠術(shù)后全部喂養(yǎng)成活，以皮片質(zhì)地變硬、失去彈性、顏色變黑為判斷皮片壞死的標準，測量皮片成活面積。切取范圍為1cm2大小的各組皮片幾乎完

7、全成活，四組皮片成活面積和成活部分平均寬度無明顯差異；4cm2和9cm2大小的各組皮片均出現(xiàn)中心部分不同程度的壞死，表皮部分壞死剝脫，皮膚色黑、質(zhì)硬，失去彈性，皮片四邊周緣出現(xiàn)寬度不等不規(guī)則的成活區(qū)，色澤稍暗，質(zhì)地彈性可，四個處理組皮片成活面積和成活部分平均寬度均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，Q檢驗結(jié)果顯示：除B組與C組比較無差別外，其余各組間比較均有差別。D組皮片成活面積明顯高于A、B、C三組，B、C兩組皮片成活面積高于A組。組織學觀

8、察：(1)四組皮片壞死區(qū)組織學形態(tài)相似，均表現(xiàn)為急性炎癥，中性粒細胞、單核細胞浸潤，肌層壞死；(2)各組皮片成活區(qū)表現(xiàn)：A組帶真皮下血管網(wǎng)皮片皮膚組織層次破壞嚴重，大量中性粒細胞及單核細胞浸潤，可見少量萎縮血管，罕見新生毛細血管，B、C組真皮深層可見少量毛細血管，管腔較大，管壁完整性較好，D組皮片成活區(qū)新生血管密度、肉芽組織形成均明顯高于其它組，血管增生明顯，全層炎性細胞浸潤較其它組輕，大量肉芽組織形成，大量新生血管，新生血管主要表現(xiàn)為

9、毛細血管。當帶真皮下血管網(wǎng)皮片切取范圍1cm2時，四組皮片新生毛細血管數(shù)量無明顯差異。當帶真皮下血管網(wǎng)皮片切取范圍為4cm2和9cm2時，四個處理組均有統(tǒng)計學意義，Q檢驗結(jié)果顯示：除B組與C組比較無差別外，其余各組間比較均有差別。D組皮片成活部分新生毛細血管數(shù)量明顯高于A、B、C三組，B、C兩組皮片新生毛細血管數(shù)量高于A組。 結(jié)論： (1)帶真皮下毛細血管網(wǎng)皮片應用bFGF浸泡后肉芽組織增生明顯，增加了肉芽組織及移植皮片

10、中血管的數(shù)量，說明bFGF對肉芽組織中成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞等的增殖與分化有促進作用，為肉芽組織的生長、皮片的成活愈合提供了較好的營養(yǎng)環(huán)境，為移植皮片的成活愈合提供了基礎。 (2)帶真皮下血管網(wǎng)皮片經(jīng)過缺血預處理后，加強了細胞的耐缺血能力，并可以使皮片周緣形成更多的新生毛細血管，加快毛細血管化的進程，從而加快肉芽組織的生長速度。 (3)通過本實驗觀察表明帶真皮下血管網(wǎng)皮片基底血運被阻斷時，依靠邊緣血管吻接的