內(nèi)臟脂肪素對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-1、TIMP-1及ICAM-1表達(dá)的影響.pdf

1、背景：
　　 動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是各種心腦血管疾病最重要的危險(xiǎn)因素，隨著人民生活水平的提高及飲食結(jié)構(gòu)的改變，肥胖以及與肥胖相關(guān)的疾病如糖尿病、高血壓及高脂血癥等的發(fā)病率也逐漸增加，并通過(guò)多種機(jī)制介導(dǎo)著AS的形成與發(fā)展。近年來(lái)的研究證明，肥胖患者體內(nèi)過(guò)量的脂肪組織分泌的多種細(xì)胞因子在AS的發(fā)生中發(fā)揮著重要的作用。
　　 內(nèi)臟脂肪素(visfatin)是新發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞因子，不僅與多種炎

2、癥疾病有關(guān)，還參與調(diào)節(jié)多種炎癥因子的合成與分泌，能夠促進(jìn)單核細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(ICAM-1)和內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)。已有研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟脂肪素在頸動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中顯著表達(dá)。提示內(nèi)臟脂肪素可能作為炎癥介質(zhì)參與了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)及基質(zhì)金屬蛋白酶抑制物1(TIMP-1)和ICAM-1在炎癥所致的內(nèi)皮細(xì)胞損傷中具有重要的作用。
　　 目的：
　　 本研

3、究通過(guò)觀察不同濃度的內(nèi)臟脂肪素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞(vein endotheliacell，VEC)MMP-1、TIMP-1及ICAM-1基因表達(dá)的影響，在基因表達(dá)水平探討內(nèi)臟脂肪素?fù)p傷血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化和斑塊破裂的相關(guān)機(jī)制。
　　 研究方法：
　　 采用體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)株，將傳至3～6代時(shí)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為研究對(duì)象。分別用濃度為100ng/ml、200ng/ml、400ng/ml、

4、800ng/ml的內(nèi)臟脂肪素干預(yù)細(xì)胞24小時(shí)，用Trizol法提取細(xì)胞總RNA，采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)半定量檢測(cè)不同濃度內(nèi)臟脂肪素刺激后內(nèi)皮細(xì)胞iMP-1、TIMP-1和ICAM-1mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)不同濃度的內(nèi)臟脂肪素刺激內(nèi)皮細(xì)胞24小時(shí)后，內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的iMP-1mRNA顯著增多，且呈濃度依賴(lài)性。
　　 (2)不同濃度的內(nèi)臟脂肪素刺激內(nèi)皮細(xì)胞24小時(shí)后，內(nèi)皮細(xì)胞

5、表達(dá)的TIMP-1mRNA呈濃度依賴(lài)性下降，MMP-1/TIMP-1比值隨內(nèi)臟脂肪素干預(yù)濃度的增高而逐漸升高。
　　 (3)不同濃度的內(nèi)臟脂肪素刺激內(nèi)皮細(xì)胞24小時(shí)后，內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1mRNA水平顯著升高，且其濃度越高，刺激內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)ICAM-1mRNA的作用就越強(qiáng)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)內(nèi)臟脂肪素能夠促進(jìn)體外培養(yǎng)的人血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)iMP-1，下調(diào)TIMP-1的表達(dá)，且呈劑量依賴(lài)性，MMP-1